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A549细胞Z好用什么培养基

panda_line 2017-01-01
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卟简灬单
1、培养A549细胞,了解A549细胞的倍增周期,扩增A549细胞;2、收集A549细胞并计数,按照一定的密度如2500细胞/孔,25uL/孔(参考值,需进行优化)进行铺板;3、在细胞板内培养一定时间,如24h等,该时间需要根据具体实验和铺板密度来确定,并且需要优化,至少要等到细胞贴壁之后才可以进行下一步;4、配制ABCD化合物溶液,通常将化合物溶解在DMSO中。由于细胞对DMSO敏感,因此在进行正式实验之前需要对实验体系进行DMSO耐受测试,获得A549在该实验体系中的Z大DMSO耐受量。假设A549能够耐受1%的DMSO,那么需要配制100×终浓度的ABCD化合物溶液,并用培养基稀释到终浓度。5、弃掉细胞培养板中的培养液,将配好的化合物溶液转移到细胞培养板中,进行加药处理;6、培养一段时间,例如24h,48h等(该时间需要进行优化),取出细胞培养板,向其中加入PromegaCaspase3/7Glo检测试剂,震荡10分钟后用酶标仪读板。7、将获得的数值与阴性对照、阳性对照进行比较并转换成作用百分比,即可判断该化合物是否有效。如果化合物配制时是配制的梯度溶液,还能获得活性化合物的IC50.
11 0 2017-01-02 0条评论 回复
推窗望月ok
A549细胞是很常见的细胞,培养基各个实验室也不尽相同,有用DMEM的、有用RPMI-1640的,但是用的Z多的也是官方的一个培养条件是:F12K+10%FBS,类似ATCC、ECACC、DMSZ等大型细胞库都是用的这个培养体系。---------上海盖宁生物
15 0 2018-07-16 0条评论 回复
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