怎样提高显微镜的分辨率

显微镜的分辨率是指能被显微镜清晰区分的两个物点的Z小间距的能力。
其计算公式是σ=λ/NA
式中σ为分辨率；λ为光线的波长；NA为物镜的数值孔径（NA=nsina/2，n为介质的折射率，a为孔径角，即样品对物镜孔径角）。可见物镜的分辨率是由物镜的NA值与照明光源的波长两个因素决定。NA值越大，照明光线波长越短，则σ值越小，分辨率就越高。
要提高分辨率，即减小σ值，可采取以下措施
（1） 降低波长λ值，使用短波长光源。
（2） 增大介质n值以提高NA值（NA=nsina/2）。
（3） 增大孔径角a值以提高NA值。
（4） 增加明暗反差。

采用高数值孔径的镜头，这是Z有效的办法。

显微镜分辨率的高低与分辨距离d有关。 d=波长 / 2×物镜数值孔径。波长越短，分辨距离d越小，分辨率就越高；物镜数值孔径越大，分辨距离越小，分辨率越高。