如何制作共聚焦显微镜的细胞切片

如何制作共聚焦显微镜的细胞切片
石蜡切片法 ：
石蜡切片法是以石蜡作包埋剂，用旋转切片机将材料切成薄片，经一系列处理制成制片的方法.在研究植物的细胞，组织，胚胎以及形态等方面石蜡切片法是Z理想的制片方法.
石蜡切片法的一般流程为:取材→固定→抽气→洗涤→脱水→透明→浸蜡→包埋→修块→切片→粘片→染色→封片.
取材
用锋利的刀片切取新鲜的植物材料，选定适宜的材料，立即固定.
取材的注意事项如下:
(1)取材料要新鲜.动作要迅速，以免挤压损坏组织;取病理材料时，应设置对照材料.
(2)所取材料大小要适当:根和茎一般直径≤5mm，切取成5-10mm小段;叶片一般取过中脉处，切成2-5mm宽，5-8mm长.在切材料时，必须注意刀片与中轴成直角，两切面平行，否则制成的切片细胞是斜的. 雌，雄蕊一般不需分割.
(3)取材时间可根据切片要求有所区别.如:在进行植物发育的研究过程时，需要找到细胞分裂相，一般在晴天的早晨9:00-10:00时取材，此时植物细胞分裂活动较明显.
(4)取材不易过老，否则制片有难度(过老的材料须在滑走切片机上进行);对纵切的材料适当多取材，如根尖，茎尖等，因为切到材料正中的概率较低.
(二)固定
将已切好的材料尽快地浸入相当于材料10-15倍体积的固定液中.借助固定液的作用，使细胞的新陈代谢瞬时停止，并保持细胞或组织的形态构造及其内含物的状态不发生变化.从而达到使组织变硬从而便于切片，增强内含物的折光度，令细胞易于着色的目的，同时具有防腐作用.以新鲜配制固定液效果较好.固定的时间依材料的种类，性质，大小等而定.材料固定完毕，保存于加盖的容器内，贴上标签.
良好的固定剂，应是穿透力强，使细胞立刻致死，原生质全部凝固;不发生任何变形，增强折光率，并且不妨碍染色.
常用固定液:
简单固定液 以一种化学药品配制的固定液.