氨基酸序列相同、在细胞内正常合成时其蛋白质空间结构一定相同吗

细胞内的内源蛋白，基本可以认为是相同的，外源转染的，同一种细胞内，基本也可以认为相同。分子量较小的自然界本身存在的多肽，即使用化学合成的方法，其空间结构也是相同的。蛋白的一级结构和它的折叠方式是有很大关系的。

不一定，
给你举一个反例，变构蛋白本身就是靠别构激活剂改变自己的构象 来调节自己的酶活性
还有血红蛋白 结合和不结合氧时的空间结构也不同
1L说的阮病毒也是个例子