在RQ-PCR中，管家基因的引物应如何设置？谢谢

housekeeping gene的引物设计与你想探测的目标基因引物设计方法相同，而且一般文献上都应该给出，遵照文献使用即可，一般问题都会出在目标基因的引物设计上。不过在q-PCR中，housekeeping gene 引物还需注意以下几点
1. 首先找到合适的housekeeping gene，其表达应具有一致可参考性。
2. 引物长度在17-22bp。
3. 引物退火温度在57°-60°之间，并且各个引物之间的退火温度差异不能超过1°。
4. 引物所扩增基因的大小在50-400bp间，通常不超过200bp为宜。
5. 引物本身无自身折叠，或者两引物之间互补的情况存在。
6. 引物设计所扩增的目标基因，Z好是跨越两段外显子的区域，这保证引物所扩增的基因，全部来自mRNA转化的cDNA，而非基因组DNA。