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请问RT-PCR的主要过程是什么?稍微详细点 谢谢~~

马国斌521 2012-02-24
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两只小蜜蜂YU
不晓得你说的是RT-PCR(reverse transcription PCR)呢,还是实时PCR(real-time PCR)。如果是反转录的话,步骤如下:

1.电泳定量RNA或直接测定RNA浓度。

2.反转录体系:(20 μl)
RNA+DEPC 水: 11μl, RNA量1-5μg
Oligo dT: 1μl
5X RTase Buffer: 4μl (10X RTase Buffer 2μl + 2μl DEPC 水)
Ribololck Rnase Inhibitor: 1μl
dNTP: 2μl
RTase : 1μl
Total:20 μl
42℃放置60min,70℃放置5min终止反应。
3.稀释母液模板,进行PCR反应。
13 0 2012-02-26 0条评论 回复
youmeng009850
买一个试剂盒 按照试剂盒说明来就行 注意低温操作
4 0 2012-02-25 0条评论 回复
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