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全自动组织研磨机破碎酵母细胞实验-上海净信

深度解析

验地点:中科院生物物理所生物大分子国家ZD实验室

用户:常文瑞组



实验方法

1、破碎前的准备:

0.1g菌体(本实验以0.1g菌体为例);

直径3号陶瓷珠;

研磨机(选用品牌上海净信科技TS-24);

预处理好的2ML研磨管;

模块冷冻。

2、研磨:

0.1g菌体,5000r/min离心1min后去上清,加入等体积的玻璃珠,加入0.5MLPBS溶液,放入预先冷冻好的模块中,放入上海净信科技的研磨机中,调整频率为60Hz,震荡时间60s.

注:破菌效率随着液体体积的增加而增加,液体体积达到100ul时开始达到Zda破菌效率。

附:陶瓷珠回收,以下是方法:

1、将含陶瓷珠的EP管,放置在大烧杯中,用自来水中浸泡2-3天。

2、用镊子将陶瓷珠和细胞碎片等全部抖落到烧杯中。静置待玻璃珠沉淀后,轻轻将上面悬浮的细胞碎片倒掉,在加水重悬陶瓷珠。

3、重复步骤2,4-5次直到所有的细胞碎片都去除干净。

4、加入适量的浓硝酸(将陶瓷珠全部覆盖即可),浸泡过夜。

5、去离子水洗三次,置烘箱中干燥即可。


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2004-09-10
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