细胞培养的一般过程,主要包括准备、取材、培养和冻存复苏4步。为保存细胞,特别是不易获得的突变型细胞或细胞株,要将细胞液氮罐冻存。液氮罐冻存的温度一般用一196℃液氮温度,将细胞收集至冻存管中加入含保护剂(一般为二甲基亚砜或甘油)的培养基,以一定的冷却速度液氮罐冻存,Z终保存于液氮罐中。在极低的温度下,细胞保存的时间几乎是无限的。
目前美国标准细胞库或细胞银行(ATCC)液氮冻存有3200个已经过鉴定的细胞系(1992),其中包括来自正常人和各种疾病患者的皮肤成纤维细胞系和来自不同物种的近75个杂交瘤细胞株。
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