从免疫原性及不乱性等方面临5种抗原进行比较,选择活化酯法合成的BSA-SM/b作为免疫抗原,通过杂交瘤技术获得1株能不乱分泌抗链霉素特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株5C10。通过实验比较了5种样品处理方法,ELISA试剂盒选择用Careez法处理并4倍稀释后用于测定。为探索一种能够快速有效的检测牛奶中链霉素残留的方法,本研究采用单克隆抗体技术等技术,合工抗原,制备出抗链霉素单克隆抗体,建立了检测牛奶中SM残留的ELISA测定法,组建成链霉素快速检测ELISA试剂盒并进行了优化和实际应用。
作为一种敏捷、快速、特异性强的方法,酶联免疫吸附测定法正逐渐应用于药物的残留检测,海内外已经建立了多种检测牛奶中链霉素贱留的理化检测方法,固然有些方法比较敏捷、精确,但因为方法复杂、耗时长、花费大、技术要求高等原因而不适合大批量样品的筛选。制备的腹水效价为1∶1280000,蛋白浓度为26.2mg/ml,与其他KJ药物的交叉反应率均低于0.1%。尺度曲线的批内变异系数为11.87%,均匀批间变异系数为8.017%。建立ELISA试剂盒尺度曲线的线性方程为y=1.8061-0.4932x(线性范围25~2500ng/ml),其LOD为8.11ng/ml,低于划定的牛奶中链霉素Zdi残留限量200ng/ml。然而不规范用药会引起畜禽产品尤其是泌乳动物乳汁中的药物残留,对人类的健康构成潜伏危害。