l本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中(8-iso-PG)elisa检测,8异前列腺素的含量。l有效期：6个月l保存条件：2-8℃(8-iso-PG)elisa检测,8异前列腺素试剂盒实验原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被(8-iso-PG)elisa检测,8异前列腺素捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的(8-iso-PG)elisa检测,8异前列腺素呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。(8-iso-PG)elisa检测,8异前列腺素试剂盒样本处理及要求1.血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2.血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2-8°C1000g离心20分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3.细胞培养物上清或其它生物标本：1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
注：标本溶血会影响Z后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。需要而未提供的试剂和器材1.酶标仪（450nm）2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱4.蒸馏水或去离子水(8-iso-PG)elisa检测,8异前列腺素试剂盒问题解析：1.试剂的选择：选择优良试剂大家都是知道的，但是在检测之前还应该提前半个小时将试剂拿到常温下进行解冻。2.加样中可能遇到的问题：在做血清或是血浆用于检测试剂的时候，会碰到血清血浆不好分离的情况，这个时候的解决办法Z好是先放在常温中1到2小时，然后在进行离心处理3.洗板时容易造成误差：因为洗板是人工洗的，所以判断什么时候洗干净了也是人为判断的，这个时候带有主观色彩，所以Z好多清洗几次，还有就是在洗的时候孔与孔之间的液体容易交叉流动4.显色问题：使用了过期的显色剂或者是显色剂用过后放置时间太长，都有可能造成显色剂不显色。所以在进行显色反应的时候，要先查看显色剂本身的情况5.终止反应：在加终止剂的时候由于倾倒速度快，差生气泡，造成假阳性结果。所以在倒终止剂的时候要缓慢倒6.读板：读板的时候首先应该保证板的清洁干净试剂准备试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。操作步骤1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。2.设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；3.样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。4.除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。5.弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。7.每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。实验结果计算以所测标准品的OD值为横坐标，标准品的浓度值为纵坐标，在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线，并得到直线回归方程，将样品的OD值代入方程，计算出样品的浓度。试剂盒性能1.特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。2.重复性：板内变异系数小于10%，板间变异系数小于15%。注释：本公司所有产品仅用于科研，不得用于临床。
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2005-02-24
