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大肠杆菌培养基如何消除组织培养的污染?

深度解析

大肠杆菌培养基是供微生物、植物组织和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)以及维生素和水等。培养基一类型细胞没有固定的培养条件。然而在开始进行新的细胞培养时,需要消除组织培养的污染,其步骤如下:
①在无抗生素的培养基中消化、计数和稀释细胞,稀释到常规细胞传代的浓度。
②分散细胞悬液到多孔培养板中,或几个小培养瓶中。在一个浓度梯度范围内,把选择抗生素加入到每一个孔中。
③每天观测细胞毒性指标,如脱落,出现空泡,汇合度下降和变圆。
④确定抗生素毒性水平后,使用低于毒性浓度2-3倍浓度的抗生素的培养液培养细胞2-3代。
⑤在无抗生素的培养基中培养细胞一代。
⑥重复步骤4。
⑦在无抗生素的培养基中培养4-6代,确定污染是否以已被消除。
大肠杆菌培养基在进行新的细胞培养时,必须先消除组织培养的污染,这样才不会影响实验的效果。
300mg130344-制霉素效价测定
100mg130345-200802磺苄西林含量
约200mg130347-200403乙酰螺旋霉素效价测定
200mg130348-9301核糖霉素效价测定
200mg130350-200001磷霉素效价测定
200mg130351-200303罗红霉素效价测定
200mg130352-200706阿奇霉素效价测定
150mg130353-200001西梭米星效价测定
200mg130354-200001大观霉素效价测定
大肠杆菌培养基


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2005-02-19
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