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使用小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白6(IGFBP-6)北京血清检测前请务必认真阅读说明书！
小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白6(IGFBP-6)北京血清检测为体外检测的科学研究用产品，不能用于临床诊断,盒子内的试剂不能用于注射，口服或者其他临床用途。
小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白6(IGFBP-6)北京血清检测GoatTumornecrosisfactorα,TNF-αELISAKit试剂盒组成及试剂配制1.酶联板：一块（96孔）2.标准品（冻干品）：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为1,000pg/ml，做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释）后，分别稀释1,000pg/ml，500pg/ml，250pg/ml，125pg/ml，62.5pg/ml，31.2pg/ml，15.6pg/ml，样品稀释液直接作为标准浓度0pg/ml，临用前15分钟内配制。如配制500pg/ml标准品：取0.3ml（不要少于0.3ml）1,000pg/ml的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。3.样品稀释液：1×20ml。4.检测稀释液A：1×10ml。5.检测稀释液B：1×10ml。6.检测溶液A：1×120μl（1:100）临用前以检测稀释液A1:100稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（100μl/孔），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl检测溶液A加990μl检测稀释液A的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。7.检测溶液B：1×120μl/瓶（1:100）临用前以检测稀释液B1:100稀释。稀释方法同检测溶液A。8.底物溶液：1×10ml/瓶。9.浓洗涤液：1×30ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。10.终止液：1×10ml/瓶（2NH2SO4）。11.覆膜：5张12.使用说明书：1份
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辣根过氧化物酶（HRP）是一种糖蛋白，每个分子含有一个氯化血红素（protonhemin）区作辅基。酶的浓度和纯度常以辅基的含量表示。氯化血红素辅基的Zda吸收峰是403nm，HRP酶蛋白的Zda吸收峰是275nm，所以酶的浓度和纯度计算式是（已知HRP的A（1cm403nm1%）＝25，式中1％指HRP百分浓度为100ml含酶蛋白1g，即10mg/ml，所以，酶浓度以mg/ml计算是HRP的A（1cm403nmmg/ml=2.5）HRP纯度（RZ）=A403nm/A275nm纯度RZ（ＲeinheitZahl）值越大说明酶内所含杂质越少。高纯度HRP的RZ值在3.0左右，Zgao可达3.4。用于ELISA检测的HRP的RZ值要求在3.0以上。ELISA的基本原理有三条：（1）抗原或抗体能以物理性地吸附于固相载体表面，可能是蛋白和聚苯乙烯表面间的疏水性部分相互吸附，并保持其免疫学活性（2）抗原或抗体可通过共价键与酶连接形成酶结合物，而此种酶结合物仍能保持其免疫学和酶学活性（3）酶结合物与相应抗原或抗体结合后，可根据加入底物的颜色反应来判定是否有免疫反应的存在，而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例的，因此，可以按底物显色的程度显示试验结果。
ELISA小常识：抗HIV-ELISA试剂目前对HIV的检测原料有了较大改进，主要如下：（1）可用于检测血清或血浆中HIVIgM亚特异性抗体和检测HIV-1、2和多种亚型。（2）标记的抗原：a.含HIV-1B亚型gp41和P24的HIV-1重组融合蛋白。b.可特异性检测血清或血浆中HIVM群的抗体，绝大多数HIV-1.0群和HIV-2群的抗体。c.gp36免疫调控区的HIV-2多肽可测定特异性的HIV-2抗体。d.gp41的俩段HIV1.0群多肽，可测特异性HIV1.0群的抗体和HIV1M群的抗体。HIV-1.0.2对759份各类临床样品包括401份HIV-1感染不同阶段病人样品，204分HIV-2感染不同阶段病人样品，和154份与HIV无关的其他疾病患者的样品的检测结果。特异性：99.93%灵敏度：1**%
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