酶联免疫Elisa试剂盒实验方法

对比测试

酶联免疫Elisa试剂盒实验方法：
基本原理：
本实验采用双抗体夹心ELISA法。用抗小鼠IgG单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的IgG与单抗结合，加入酶标抗体，形成免疫复合物连接在板上，加入酶底物TMB，出现蓝色，加终止液硫酸，颜色变黄，在450nm处测OD值，IgG浓度与OD值成正比，可通过绘制标准曲线求出标本中IgG浓度。
操作步骤：
实验开始前，各试剂均应平衡至室温（试剂不能直接在37℃溶解）；试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。
1.加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。
2.弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液100μl（在使用前一小时内配制），酶标板加上覆膜,37℃反应60分钟。
3.温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，大约400μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。
4.每孔加检测溶液B工作液（同检测A工作液）100μl，酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5.温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。
6.依序每孔加底物溶液90μl，酶标板加上覆膜37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。
7.依序每孔加终止溶液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8.用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。在加终止液后立即进行检测。
酶联免疫Elisa试剂盒胆碱磷酸甘油酯(PC/CPG)ELISA试剂盒，英文名：PC/CPGELISAKit
胆固醇酯转移蛋白(CETP)ELISA试剂盒，英文名：CETPELISAKit
胆固醇7α-羟化酶(CYP7A)ELISA试剂盒，英文名：CYP7AELISAKit
胆固醇(CH)ELISA试剂盒，英文名：CHELISAKit
单丝氨酸蛋白激酶1(LIMK1)ELISA试剂盒，英文名：LIMK1ELISAKit
单核细胞增多性李斯特菌素O((LLO)ELISA试剂盒，英文名：LLOELISAKit
单核细胞趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA试剂盒，英文名：MCP-4/CCL13ELISAKit
单核细胞趋化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA试剂盒，英文名：MCP-3/CCL7ELISAKit
单核细胞趋化蛋白2(MCP-2/CCL8)ELISA试剂盒，英文名：MCP-2/CCL8ELISAKit
单核细胞趋化蛋白2(MCP-2)ELISA试剂盒，英文名：MCP-2ELISAKit
单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA试剂盒，英文名：MCP-1/CCL2/MCAFELISAKit
单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)ELISA试剂盒，英文名：MCP-1ELISAKit
单胺氧化酶(MAO)ELISA试剂盒，英文名：MAOELISAKit
带3蛋白(Band3)ELISA试剂盒，英文名：Band3ELISAKit
大疱性类天疱疮抗体(BP)ELISA试剂盒，英文名：BPELISAKit
大内皮素(BigET-1)ELISA试剂盒，英文名：BigET-1ELISAKit
大内皮素(BigET)ELISA试剂盒，英文名：BigETELISAKit
大肠菌素(colicin)ELISA试剂盒，英文名：colicinELISAKit
大肠癌专一抗原4(CCSA-4)ELISA试剂盒，英文名：CCSA-4ELISAKit
大肠癌专一抗原3(CCSA-3)ELISA试剂盒，英文名：CCSA-3ELISAKit
大肠癌专一抗原2(CCSA-2)ELISA试剂盒，英文名：CCSA-2ELISAKit
存活素抗体/生存蛋白(Surv)ELISA试剂盒，英文名：SurvELISAKit
脆性组氨酸三联体(FHIT)ELISA试剂盒，英文名：FHITELISAKit
催乳素诱导蛋白(PIP)ELISA试剂盒，英文名：PIPELISAKit
催乳素YZ激素(PIH)ELISA试剂盒，英文名：PIHELISAKit酶联免疫Elisa试剂盒

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2005-01-27