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鲤鱼卵黄蛋白原ELISA试剂盒标本及采集、贮运因素

深度解析

鲤鱼卵黄蛋白原ELISA试剂盒标本及采集、贮运因素

鲤鱼卵黄蛋白原ELISA试剂盒标本及采集、贮运因素:
(1)鲤鱼卵黄蛋白原ELISA试剂盒严重溶血,以HRP为标记的ELISA测定中,残留在孔内的血红蛋白具有过氧化物酶样活性,催化底物显色造成假阳性; 
(2)混有红细胞的血清易沉淀或附着在聚乙烯孔内不易洗净;
(3)如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应; 
(4)标本凝固不全,有时为了争取时间快速检测,常在血液还未开始凝固时即强行离心分离血清,使血清中仍残留部分纤维蛋白原,在ELISA测定过程中可以形成肉眼可见的纤维蛋白块,易造成假阳性结果; 
(5)采血试管洗涤不彻底、反复使用易交叉污染; 
(6)塑料试管能吸附抗原物质,样本久置在塑料管内会使样本内抗原含量下降造成假阴性。 
ELISA结果判定常用的几种方法:
1)目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照;与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
2)以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3)以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性;P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑;P/N小于1.5为阴性。
4)定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。

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2004-07-23
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