大鼠糖化白蛋白(GA)ELISA检测试剂盒
试剂盒组成
名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板
12孔×8条12孔×4条无标准品(800pg/ml)
0.5mL0.5mL按说明书进行稀释标准品稀释液
6mL3mL按说明书进行稀释样本稀释液
6mL3mL按说明书进行稀释检测抗体-HRP
6mL3mL无20×洗涤缓冲液
20mL20mL按说明书进行稀释底物A
6mL3mL无底物B
6mL3mL无终止液
6mL3mL无封板膜
2张2张无说明书
1份1份无自封袋
1个1个无注:标准品用标准品稀释液依次稀释为:800、400、200、100、50、0pg/ml.试剂的准备
20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法
手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。操作步骤
从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。设置标准品孔、样本孔和空白孔,空白孔什么都不加;标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;待测样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;随后标准品孔和样本孔中(空白孔不加)加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体50μL,,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。所有孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。所有孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。仪器网-专业分析仪器服务平台,实验室仪器设备交易网,仪器行业专业网络宣传媒体。
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