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大鼠糖化白蛋白(GA)ELISA检测试剂盒

专业评测

大鼠糖化白蛋白(GA)ELISA检测试剂盒

试剂盒组成

名称

96孔配置

48孔配置

备注

微孔酶标板

12孔×8条

12孔×4条

标准品(800pg/ml)

0.5mL

0.5mL

按说明书进行稀释

标准品稀释液

6mL

3mL

按说明书进行稀释

样本稀释液

6mL

3mL

按说明书进行稀释

检测抗体-HRP

6mL

3mL

20×洗涤缓冲液

20mL

20mL

按说明书进行稀释

底物A

6mL

3mL

底物B

6mL

3mL

终止液

6mL

3mL

封板膜

2张

2张

说明书

1份

1份

自封袋

1个

1个

注:标准品用标准品稀释液依次稀释为:800、400、200、100、50、0pg/ml.

试剂的准备

20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。

洗板方法

手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。

操作步骤

从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。设置标准品孔、样本孔和空白孔,空白孔什么都不加;标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;待测样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;随后标准品孔和样本孔中(空白孔不加)加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体50μL,,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。所有孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。所有孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。


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2004-12-08
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