仪器资讯
关键词:
简介：世界品牌原装，质量保证,价格优惠。
pCzn1质粒+ArcticExpress宿主菌低温表达体系。
我们具备丰富的蛋白表达设计经验及实验操作技巧，承诺客户不成功不收费。我们所有的实验数据真实可信，我们提供原始的表达菌株和克隆质粒，客户可以依据我们的实验报告重复我们的实验结果。
产品品牌：
测序实验流程：
实验方法原理
SD胎鼠脑皮层神经元体外培养7d，微量移液器塑料滴头于培养孔内机械性划割培养之神经元，依划割程度不同分为轻、中、重3组，对照组除不进行机械性划割，其余处理同损伤组，伤后不同时间点（10，30min，1，3，6，12，24h）检测细胞存活率及培养液上清乳酸脱氢酶(LDH)含量。
实验材料SD大鼠
试剂、试剂盒硼酸硼砂缓冲液胰酶-EDTA消化液D-Hanks’
仪器、耗材眼科剪滴管离心机培养皿CO2培养箱
实验步骤
1.孕16dSD大鼠经钠麻醉后，碘酒、75%乙醇消毒腹部皮肤，依次剪开皮肤、肌肉、皮下筋膜，无菌操作下取出胚胎放入预冷的D-Hanks’平衡盐液中。
2.在解剖显微镜下分离并取出胚胎大脑皮层，除去脑膜，剪碎组织成约1mm3大小，加入胰酶-EDTA消化液并放入37℃孵箱内消化20min，中间摇晃一次。
3.随后用滴管吸出组织转移到装有预冷的培养液(DMEM＋10%FBS)的离心管内终止消化液作用5min。
4.用滴管吸出组织转移到装有预冷的DMEM＋10%FBS的离心管内，用火焰抛光的巴斯德滴管吹打数次，静置后取上清吸到另一支离心管内。重复上述步骤2～3次。
5.将所收集的上清经200目筛网过滤。
6.过滤后的细胞悬液于800rpm离心5min，弃上清，管内加入新鲜培养液(DMEM＋20%FBS)并吹打成单细胞悬液。
7.细胞计数，调整细胞密度按1.5×105/cm2种入6孔板内，放入CO2孵箱中培养。培养48h后换液并加入Ara-C使其终浓度为1×10-5mM/L。Ara-C作用24h后全量换液。以后每隔3天半量换液一次。
注意事项
1.上面的步骤是传统方法。有许多地方可以进行改动：如消化时可以直接用0.125-0.25%的胰酶消化15-20min左右，也可用DNA酶进行消化，有人还直接进行吹打，都可行。
2.上面虽然时大鼠皮层神经元，但是同样适用于小鼠，但是应该选择孕13d左右的小鼠。
3.神经元是一种比较难培养的细胞，因此在接种时细胞的密度一定要够。
4.在玻片上培养神经元时，一定要注意玻片的来源和处理方法，这个非常重要，对神经细胞的影响是很大的。如果您现在在玻片上培养的神经元生长情况还不错的话，那么您在以后的培养中Z好还是用同一来源(厂家)的玻片。
5.如果有B27和neurobasal培养基，那么就方便了(不用加AraC):
(1)把细胞悬液用(DMEM＋20%FBS)悬浮，种到培养皿上6－12h后，全量换成2%B27的neurobasal培养基，继续培养，3d半量换液。
(2)把细胞悬液用直接用2%B27的neurobasal培养基悬浮接种。
(3)可以用新生1d内的胎鼠皮层直接培养。
仪器网-专业分析仪器服务平台,实验室仪器设备交易网,仪器行业专业网络宣传媒体。
相关热词：
等离子清洗机,反应釜,旋转蒸发仪,高精度温湿度计,露点仪,高效液相色谱仪价格,霉菌试验箱,跌落试验台,离子色谱仪价格,噪声计,高压灭菌器,集菌仪,接地电阻测试仪型号,柱温箱,旋涡混合仪,电热套,场强仪万能材料试验机价格,洗瓶机,匀浆机,耐候试验箱,熔融指数仪,透射电子显微镜。
