离子交换键合相色谱仪流动相多为一定pH值的缓冲液,有机成分作改性剂。
一、溶质保留机理:
兼有离子交换和吸附双重机理。
二、影响溶质保留值的因素:
1、流动相的pH值:
(1)弱酸和弱碱的保留值与洗脱液的pH值有关。
解离并参加离子交换而被分离。
不解离,不参加离子交换,以分子形式几乎无保留地通过色谱柱。
流动相的pH值选择应适中,Z好选择在被分离的酸或碱的pka或pkb附近,使其解离适中,达到Z佳分离。
采用不同pH值的缓冲液进行梯度洗脱,可提高分离度。例如阴离子交换,pH值降低,酸性弱的组分先洗脱出,酸性强的组分后洗脱出。
(2)阴离子交换剂分离有机酸的保留规律:
在用强阴离子交换键合相分离酸性药物时,pH值增大,药物解离度增大,k值增大,保留时间增加。
pH值越小,酸的解离被YZ,保留越小。
pH值越大,酸的解离程度越大,保留越强。
(3)阳离子交换剂分离有机碱的保留规律:
在用强阳离子交换键合相分离碱性药物时,pH值增大,游离碱增加,k值减小,保留时间缩短。
pH值高,碱以分子形式存在,保留值很小。
pH值低,碱以质子化形式存在,保留值较大。
2、流动相的离子强度:
流动相的离子强度(缓冲盐浓度)增加,k减小。原因是离子交换平衡的移动。
3、有机改性剂:
如果洗脱液中加入极性有机组分(如乙醇),则YZ离子交换,产生按分配机理进行的分离。
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