组织培养配方研制
组织培养配方的研制是组培技术的关键,但受材料,经验等因素的影响,实际生产中配方研究的方法千差万别,但总体来说还是有章可循的,简单介绍一些常用方法,以供参考。1、配方的研制方向
1、去分化----诱导形成原球茎、愈伤组织、
2、再分化芽----原球茎形成植株、不定芽形成植株、胚状体、珠茎、花芽、叶、鳞片母体组织直接产生小植株、无菌短枝扦插腋芽萌发
3、芽苗伸长---小苗拔高,成为幼苗。
4、再分化根---愈伤、茎部直接生根
激素一般配比规律Skoog和Miller等所提出的生长素和激动素比例决定根和芽分化的观点,曾被大量的试验结果所证明。因此二者的浓度和比例非常重要,其合适的配比就是常说的配方。狭义的配方,如:MS+BA2+NAA0。2广义的配方,如:B5+BA2+NAA0.2+糖5g+活性碳10%+200C+琼脂6g1。去分化:生长素低;细胞分裂素高
2。再分化:细胞分裂素高;生长素低
3。茎伸长:赤霉素调节4。生根:生长素高;细胞分裂素低
1.参阅外来配方:简单实用,节省时间,较为准确,效益突出。2.原配方的改造:如苹果枣组培快繁
原分化培养基:MS+6-BA4.0+NAA0.3
筛选分化培养基进行试验:以原配方BA4.0、NAA0.3为参照,设计4次重复,两两组合,则有16种配方组合,从中筛选BA、NAAZ佳组合。
6-BA----2.0、3.0、4.0、6.0mg/L
NAA-----0.05、0.1、0.3、0.5mg/L
3.新配方的研制3.1完全设计(适合因素少,水平少的试验)正交设计
正交试验设计法----它是以概率它是以概率论数理统计论数理统计、专业技术知识和实践经验为基础,充分利用标准化的正交表来安排试验方案,并对试验结果进行计算分析,Z终达到减少试验次数,缩短试验周期,迅速找到优化方案的一种科学计算方法。
我国从我国从20世纪世纪50年代开始,以ZG科学院数学研究所为基础深入研究这门科学,并应用到工农业生产中去,得到了广泛推广成绩显著。正交法之所以受到人们的关注正交法之所以受到人们的关注。
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