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《QuickCell快速支原体检测试剂盒》主要用于检测细胞培养上清或别的液体样品（如血清）中是否含有支原体污染，该试剂盒仅用于基础科研。
哺乳动物细胞的培养，支原体（Mycoplasma）污染是个世界性的问题。支原体污染几乎可以改变细胞的所有参数，导致实验结果的不准确、甚至完全错误。从2013年开始，《Nature》期刊已正式要求投稿的文章，如涉及细胞培养都要进行支原体检测。本试剂盒可以检测：（1）M.Hyorhinis、（2）M.Fermentans、（3）M.Arginini、（4）M.hominis、（5）M.orale、（6）M.salivarium、（7）M.pirum、（8）AcholeplasmaLaidlawii、（9）M.agalactiae、（10）M.bovis、（11）M.buccale、（12）M.arthritidis、（13）M.pulmonis等几乎所有常见的污染细胞的支原体（注：M.为Mycoplasma的缩写）。以上13种支原体约占细胞支原体污染的99%以上，本试剂盒产品全部可以检测。绝大多数支原体污染集中于前8种。注意：本试剂盒无法检测UreaplasmaUrealyticum支原体！UreaplasmaUrealyticum在支原体污染种极其罕见。
与PCR法检测支原体比较，本试剂盒产品优势优势显著：
比较内容支原体检测PCR法QuickCell快速支原体检测试剂盒操作时间3小时
1小时
是否需要样品处理样品需预处理，DNA提取
无需样品处理，直接使用上清
灵敏度灵敏度低
较PCR法提高1000倍
是否需要电泳需要电泳及染色
不需电泳，目测结果
试剂盒组成
（1）溶液Ⅰ：1150μL（50次检测）
（2）溶液Ⅱ：50μL（50次检测）
（3）溶液Ⅲ：指示剂，50μL（50次检测）
（4）阳性支原体DNA：50μL
（5）矿物油：1500μL
使用方法
1.待测样品的准备：为了准确判断细胞是否有支原体的污染，待测的细胞培养液样品Z好来源于至少培养三天且汇合度在70-90%左右的细胞培养上清（贴壁细胞），无需离心。悬浮培养的细胞也需要在换液传代后，至少让细胞生长3天再取培养液进行检测，也无需离心。哺乳动物细胞的存在不会影响检测结果。
注：收集的待测细胞培养液样品如果不立即检测，请放于-20℃或-80℃冰箱保存，不得放于室温或4℃冰箱。样品在-20℃至少可以保存一个月，在-80℃可以长期保存。此外，为了节约检测成本，可以将不同时间收集的样品放于-20℃或-80℃冰箱保存，而后一起检测。
2.反应体系的配制
表1：恒温反应体系的配制组份
理论单个样品用量样品总数总体积溶液Ⅰ
23μLN23×N×1.08μL溶液Ⅱ
1μLN1×N×1.08μL溶液Ⅲ
0.18μLN0.18×N×1.08μL（1）将溶液Ⅰ、溶液Ⅲ从-20℃冰箱中取出，待其融化后（可在37℃水浴内放置5-10分钟以帮助融化），从-20℃冰箱中取出溶液Ⅱ置于冰上。吹吸均匀后，按表1比例，混合溶液Ⅰ、溶液Ⅱ、溶液Ⅲ。如有多个样品，为了防止移液误差，建议溶液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ用量乘以系数1.08，保证每个反应管中的反应液足量。从配液开始的所有步骤，均在冰上操作。
举例：如果待测样品为3个（加上1个阴性和1个阳性对照），则样品总数为5个。溶液Ⅰ的总体积为23×5×1.08=124.2μL，溶液Ⅱ的总体积为1×5×1.08=5.4μL，溶液Ⅲ的总体积为0.18×5×1.08=0.972μL将溶液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ混合均匀。
注：溶液Ⅱ必须一直在-20℃冰箱中保存，并在操作时置于冰上。溶液Ⅱ即使在-20℃条件下仍为液态，不需置于室温。
（2）将上述配制好的反应体系，吹打均匀后，按每管24μL分装到0.2mL的PCR管中。尽量保证每管的反应液体积一样。PCR管应该使用透明度良好的薄壁PCR管。
（3）往测试管（Test）中加入1μL待测细胞培养液；往阳性对照管（Positive）中加入1μL阳性支原体DNA；往阴性对照管（Negative）中加入1μL灭菌水；反应液的总体积为25μL。
注1：装有阳性支原体DNA的螺口管开盖之前，用力甩一下，或者用迷你离心机即可。
注2：进行反应体系配制的房间，与进行样品前处理、加阳性对照DNA、样品DNA的房间Z好分开。
3.反应
PCR仪设置程序：61℃，60min；10℃,forever；热盖温度，100℃。
注意：若实验室反应场所没有PCR仪，可用水浴锅代替，水浴锅显示温度与实际温度的温差不超过0.5℃，另须往每个反应管内加入25μL矿物油，以防止水份挥发，然后盖上盖子，将反应管插入带孔的漂板内，放入已经升温到61℃的水浴内，准确反应60分钟。
4.结果判断
61℃反应60分钟后，立刻取出反应管，放于室温。以一张白纸或白色泡沫盒为背景，通过反应管溶液颜色的变化，即可判断检测结果。如果溶液为蓝绿色，则说明有支原体污染；如果为紫红色，则说明没有支原体污染（如图1）。
注：在61℃反应的时间必须准确计时，Z多不得超过5分钟，以免出现假阳性。必须在反应后2小时内进行结果判断，避免室温下扩增反应进行，影响结果判别。
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