豚鼠铁调素（HEPC）elisa试剂盒注意事项

豚鼠铁调素(HEPC)elisa试剂盒注意事项：

1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未

用完，板条应装入密封袋中保存。

2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间Z好

控制在 5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

4． 请每次测定的同时做标准曲线，Z好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本 OD 值

大于标准品孔diyi孔的 OD 值） ，请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计

算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5） 。

5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物请避光保存。

7．严格按照豚鼠铁调素(HEPC)elisa试剂盒说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9．本试剂不同批号组分不得混用。

10. 如与豚鼠铁调素(HEPC)elisa试剂盒英文说明书有异，以英文说明书为准。

豚鼠铁调素(HEPC)elisa试剂盒操作步骤：

1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

80μg/L  5 号标准品  150μl 的原倍标准品加入 150μl 标准品稀释液

40μg/L  4 号标准品  150μl 的 5 号标准品加入 150μl 标准品稀释液

20μg/L  3 号标准品  150μl 的 4 号标准品加入 150μl 标准品稀释液

10μg/L  2 号标准品  150μl 的 3 号标准品加入 150μl 标准品稀释液

5.0μg/L  1 号标准品  150μl 的 2 号标准品加入 150μl 标准品稀释液

2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液 40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3.  温育：用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。

4.  配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用

5.  洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此

重复 5 次，拍干。

6.  加酶：每孔加入酶标试剂 50μl，空白孔除外。

7.  温育：操作同 3。

8.  洗涤：操作同 5。

9.  显色：每孔先加入显色剂 A50μl，再加入显色剂 B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色

15 分钟.

10. 终止：每孔加终止液 50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色） 。

11. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值） 。 测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。