高速逆流色谱,英文名为High-speed Countercurrent Chromatography,HSCCC为其简称。其为美国国立卫生院Ito博士在1982年所研制开发的一种新型的、连续高效的液液分配色谱技术。
高速逆流色谱溶剂系统
上表中是按照被分离物质的极性将一些基本的可供参考的溶剂体系列出,非水体系和含水体系被包含在其中。
就HSCCC分离来说至关重要的是对于溶剂系统的选择。然而十分遗憾的是,到现在为止依然没有充分的理论依据来验证溶剂系统的选择,而是按照根据实际积累的丰富经验来选择。
高速逆流色谱溶剂系统极性分类
按照溶剂系统的极性,能够包括三类,包括弱极性、中等极性以及强极性。正丁醇-甲醇-水,氯仿-甲醇-水,正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水以及正己烷-甲醇-水等均为经典的溶剂系统。在实验中,应当按照实际情况,总结分析并且对相关的专著及文献进行参照。由所需分离的物质的类别出发去来对相似的分离实例进行寻找,对极性适合的溶剂系统进行选择,对各种溶剂的相对比例进行调节,对目标组分的分配系数进行测定,zui终对合适的溶剂系统进行选择。
高速逆流色谱溶剂系统要求:
1.为了使固定相的保留率不比50%低得到保障,那么溶剂系统的分层时间不高于半分钟。
2.为了防止溶剂的浪费,上下两相需要合适的体积比
3.挥发性溶剂尽可能被采用,为后续处理带来便利,毒性大的溶剂尽可能不要使用。
4.一般而言,溶剂系统不会导致样品的分解或者在溶剂系统中变性样品中各组分的分配系数比较合适。通常认为分配系数较为合适的范围为0.2-5。并且各组分的分配系数值的不同要足够,zui好分离因子不低于1.5
5.样品的检测不会受到溶剂系统的干扰。
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