蛋白质印迹优点、原理和步骤

免疫印迹（immunoblotting）又叫做蛋白质印迹（Western blotting），是通过抗原抗体的特异性结合来对复杂样品中的某种蛋白进行检测的方法。此方法是一种新的免疫生化技术，其是基于凝胶电泳和固相免疫测定技术发展出来的。如今免疫印迹已经成为蛋白分析的一种常规技术，因为其既具备固相免疫测定的高特异性和敏感性，又具备SDS-PAGE 的高分辨力。某种蛋白的鉴定一般使用免疫印迹，并且可以定性和半定量分析蛋白。和化学发光相结合进行检测，能够同时对多个样品同种蛋白的表达量差异进行比较。

优点

免疫印迹法是一项对抗原、抗体进行分析的技术。其具备如下优点。

1.孵育、洗涤的时间减短非常明显。

2.为了用于多种分析和鉴定，能够同时制作多个拷贝。

3.以图谱形式显示结果，能够长期保存结果。

4.免疫探针能够利用将PH值降低等方法抹掉探针，用第二探针替换来进行进行分析检测。

5.湿的固定化基质膜柔韧，操作简单便捷。

6.固定化的生物大分子能够均一地接近各种免疫探针，孔径不会对其起阻隔作用。

7.免疫印迹分析所需的试剂量较少。

基本原理

在凝胶板上单向或双向电泳分离混合抗原样品，之后取固定化基质膜与凝胶相贴。凝胶中的单一抗原组在印迹纸的自然吸附力、电场力或其它外力作用下往印迹纸上转移并且固相化，Z后应用如免疫同位素探针或免疫酶探针等免疫覆盖液技术检测和分析抗原固定化基质膜。

基本步骤

抗原分离、抗原印迹和抗原检定为免疫印迹法（ 以抗原分析为例）的三个基本步骤。因为每一步采用不同的实验方法，能够使多种免疫印迹分析系统构成。