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ELISA法检测时满板显色或者满板白,阳性对照不显色原因及解决方法

全自动酶免分析仪

酶联免疫吸附实验(ELISA) 即将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行的技术。该技术可用于检测大分子抗原和特异性抗体等,具有快速、灵敏、简便、载体易于标准化等优点。


问题:满板显色

原因1:样品的放置时间过长,样品受到了污染

解决方法:样品应当保持新鲜,应当在-20摄氏度的温度下长期保存,避免污染。

原因2:重复使用吸嘴,吸嘴没有洗干净就用来加底物或者酶

解决方法:吸嘴应当清洁干净

原因3:洗涤不充分,有酶残留在反应孔中

解决方法:洗涤要洗充分。

原因4:蒸馏水受到污染

解决方法:将蒸馏水换掉


03.jpg


原因5:反应板受到次氯酸钠的污染

解决方法:换成新的反应板。

原因6:底物受到污染或者失效

解决方法:将底物换掉

原因7:将底物加好后保温的时候,受到强光或者紫外线的照射

解决方法:显色保温的时候应当避免强光或者紫外线的照射

原因8:反应时间过长

解决方法:准确地定时

原因9:水箱的温度过高

解决方法:将水箱的温度调节准确。

原因10:加酶量过多

解决方法:要准确地进行稀释和加液。


问题:满板白,阳性对照不显色

原因

1.试剂漏加

2.将终止液当做底物或者酶结合物使用

解决方法:根据试剂说明书严格执行操作,加液的时候需要将标签看准,对洗涤液正确的稀释,试剂不要漏加

原因3:洗涤液桶受到污染,有YZ酶活性的物质存在或者蒸馏水受到污染

解决方法:保持瓶子洁净,换用合格的蒸馏水


2005-07-10
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