酶联免疫吸附实验(ELISA) 即将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行的技术。该技术可用于检测大分子抗原和特异性抗体等,具有快速、灵敏、简便、载体易于标准化等优点。
问题:满板显色
原因1:样品的放置时间过长,样品受到了污染
解决方法:样品应当保持新鲜,应当在-20摄氏度的温度下长期保存,避免污染。
原因2:重复使用吸嘴,吸嘴没有洗干净就用来加底物或者酶
解决方法:吸嘴应当清洁干净
原因3:洗涤不充分,有酶残留在反应孔中
解决方法:洗涤要洗充分。
原因4:蒸馏水受到污染
解决方法:将蒸馏水换掉
原因5:反应板受到次氯酸钠的污染
解决方法:换成新的反应板。
原因6:底物受到污染或者失效
解决方法:将底物换掉
原因7:将底物加好后保温的时候,受到强光或者紫外线的照射
解决方法:显色保温的时候应当避免强光或者紫外线的照射
原因8:反应时间过长
解决方法:准确地定时
原因9:水箱的温度过高
解决方法:将水箱的温度调节准确。
原因10:加酶量过多
解决方法:要准确地进行稀释和加液。
问题:满板白,阳性对照不显色
原因
1.试剂漏加
2.将终止液当做底物或者酶结合物使用
解决方法:根据试剂说明书严格执行操作,加液的时候需要将标签看准,对洗涤液正确的稀释,试剂不要漏加
原因3:洗涤液桶受到污染,有YZ酶活性的物质存在或者蒸馏水受到污染
解决方法:保持瓶子洁净,换用合格的蒸馏水
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