用户论文：微紫青霉CBH I酶纤维素结合结构域在大肠杆菌中

全文请访问：http://www.spm.com.cn/papers/p38.pdf


为研究纤维素酶纤维素结合结构域的结构与功能, 进而深入了解天然纤维素的生物降解机制和提高纤维素酶的生物工艺学价值, 采用PCR 技术体外扩增了携带微紫青霉外切葡聚糖纤维二糖水解酶I(CBHI ) CBD 编码区的DNA 片段, 将CBD 编码区DNA 片段插入带有E rw in iaca rotovora pe1B 前导肽序列的大肠杆菌质粒pKK2tac2new 上进行了表达L携带微紫青霉CBDCBHI编码区的大肠杆菌重组菌株DH(pKK2tac2new 28) 产生有活性的分泌型CBDCBH I 蛋白LSDS2PA GE 检测显示所产生的CBDCBHI 蛋白分子量约10. 8 kDL在IPTG 诱导下, 该菌株所产生的CBDCBH 蛋白含量达45. 2 m gˆL , 且90% 以上的CBD 蛋白分泌到培养物上清液中L结晶纤维素CF211溶液经CBDCBH 处理后, 浊度比对照提高了128. 9% , 天然棉花纤维结构经CBDCBH 处理后产生一定程度的非水解性降解作用, 表明微紫青霉CBDCBH 具有解聚天然结晶纤维素的作用

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