食品中合成着色剂的测定SPE-HPLC法（GB 5009.35-2023）

方法优势：

GB 5009.35-2023与2016版相比，着色剂检测种类由7种增加至11种，同时基质种类也进行了扩充，前处理小柱由聚酰胺粉变更为PWAX或同等类型小柱。

纳鸥科技依据GB 5009.35-2023食品中合成着色剂的测定，采用Anavo PWAX-II固相萃取柱净化,提取方法简单、回收率高、净化效果优异、方法稳定性好。

1、标准品配制

(1) 单标储备液1000 ug/mL，称取适量色素单标，用水配制成1000 ug/mL的单标储备液。

(2) 混标中间液50 ug/mL，分别吸取0.5 mL单标储备液1000 ug/mL于10 mL容量瓶中，用水定容至刻度，配制成50 ug/mL的混标中间液。

2、试样提取

2.1 液体类试样(饮料、调制乳等)、冷冻饮品(风味冰、冰棍类)

取 2g样品，置于50mL 具塞离心管中，加入25mL乙醇氨水溶液，涡旋1min，5000r/min离心5min，并用乙醇氨水溶液定容至50mL，即得提取液；准确吸取上清液10mL，50℃下氮气浓缩至3mL左右，分2次~3次共加入10mL 5%甲醇水溶液溶解，作为待净化液。

2.2 固体类试样(加工水果、酱及酱制品、香辛料等)

取2g样品，置于50mL 具塞离心管中，先加入适量水(2 mL~5 mL)，50 ℃水浴加热混匀样品，加入25 mL 乙醇氨水溶液，涡旋1 min，50 ℃超声或振摇提取20min，8000r/min离心5min，取上清液置于50mL容量瓶中，每次加入约5mL~10mL乙醇氨水溶液重复提取操作至上清液无明显颜色，离心后合并上清液，用乙醇氨水溶液定容至50mL，即得提取液。准确吸取提取液10mL，50 ℃氮气浓缩至3mL 左右，分2次~3次共加入10mL5%甲醇水溶液溶解，作为待净化液。

2.3含油量较大的试样(可可制品、巧克力和巧克力制品等)

取2g样品，置于50mL具塞离心管中，加入20mL石油醚，涡旋1min，超声或振摇提取10min，8000r/min离心5min，弃去上清液，油脂含量较高的可重复提取一次，弃去上清液，加入 25 mL 乙醇氨水溶液，涡旋 1 min，50 ℃ 超 声提取20min，8000r/min离心5min，收集上清液置于50mL容量瓶中,按照2.2中“每次加入约5mL~10mL乙醇氨水溶液……作为待净化液”操作

3、净化

Anavo PWAX-ll 150 mg/6 mL（PN：AN60A051）

4、分析条件

色谱柱：Origsil C18 250x4.6 mm，5um（PN：AN80B001）

流 速：1.0 mL/min

进样量：10 μL 柱温：30 ℃

检测器：二极管阵列检测器波长范围:400nm~800nm,检测波长:415nm(柠檬黄、喹啉黄),520nm(新红、苋菜红、胭脂红、日落黄、诱惑红、酸性红和赤藓红),610nm(靛蓝、亮蓝)。

流动相： A为20 mmol/L 乙酸铵溶液， B为甲醇，梯度设置如下

5、添加回收结果

食品中人工合成着色剂的HPLC检测的添加回收结果。

添加浓度30 mg/kg（加标量：50 ug/mL，1.2 mL）

添加浓度3.0 mg/kg（加标量：50 ug/mL，0.12 mL）

6、谱图（略）

配套关键耗材