活体颅骨光透明成像方案

光透明技术是一种让生物组织具有光学透明性的新型技术。而正常的生物组织中成分复杂，如蛋白质、脂质和血红素等物质对光的传播造成阻碍。光透明技术就是使用一种试剂或几种试剂组成的混合液通过浸泡、电泳或灌注等处理方式,使大块组织或完整器官达到视觉下透明或光学仪器下可见的效果。

活体颅骨光透明解决方案

在很多动物实验中都需要开颅手术以进行相关的实验，活体颅骨光透明后无需开颅即可进行这些实验。目前完整颅骨是观察小鼠大脑皮下神经和血管的主要障碍，为了克服这一障碍，科研工作者们开发出几种类型的颅窗，包括磨薄颅窗、开颅手术和磨薄加固颅窗等。这些颅窗在某些情况下满足研究要求，但有局限性。例如，在颅骨窗变薄的情况下，很难进行大面积重复成像；开颅手术几乎不可避免地会导致皮质损伤和炎症；至于磨薄加固颅窗操作复杂且也会造成损伤。

活体颅骨光透明试剂盒

这款试剂产品主要针对活体颅骨光透明方法，通过表面涂抹光透明剂能让颅骨在20分钟内快速透明，让激光散斑成像技术高分辨、高对比度成像皮下血管及血流分布成为可能。

活体颅骨光透明试剂盒是在武汉光电国家实验室长期对活体光透明技术研究的基础上研发的一款活体光透明试剂盒，能够在实验动物活体状态下进行颅骨透明化。试剂盒操作简单快捷、无创非侵入实现大小鼠大脑皮层神经网络、血管网络及血流流速的观察与监测,有利于研究其大脑深部皮层神经网络和血管结构与功能。

产品特点：

1、无毒、无伤害，直接颅骨涂抹

2、配合光学仪器大幅度提升原本成像深度和分辨率

3、操作简单，速度快，透明过程15min以下

4、光透明处理可逆，能反复成像

活体光透明激光散斑成像方案

特点：激光散斑监测大面积组织微循环总灌注量。包括毛细血管（营养血流）、微动脉、微静脉和动静脉吻合支，不局限于毛细血管血流监测，具有高时间和空间分辨率、波形和图像并存；组织穿透深度： 1mm。对比同类技术，将空间分辨率提高5倍，为≤3微米

活体颅骨光透明技术，通过在颅骨和皮肤上进行活体组织光透明，可直接进行大小鼠深部血管和血流成像，无需开颅也不会对颅骨造成损伤，不但提升了激光散斑血流成像深度，而且还提升了分辨率。大量实验结果表明活体光透明后的激光血流成像的结果更清晰，背景也更为“清澈”。

双光子荧光成像

双光子荧光显微镜是结合了激光扫描共聚焦显微镜和双光子激发技术的一种新技术。双光子激发的基本原理是：在高光子密度的情况下，荧光分子可以同时吸收 2 个长波长的光子，在经过一个很短的所谓激发态寿命的时间后，发射出一个波长较短的光子；其效果和使用一个波长为长波长一半的光子去激发荧光分子是相同的。

活体光透明前后小鼠脑神经双光子成像对比图

使用活体颅骨光透明试剂，对小鼠血管双光子荧光成像对比效果

实验结果表明，活体颅骨光透明试剂可以更好的加深双光子荧光成像深度，成像也更清晰，同时不需要开颅窗。