凯氏定氮仪测定 DHA 藻粉（饲料级）中粗蛋白的含量

1 前言

DHA 藻粉（饲料级）是以裂壶藻为菌种通过现代生物工程技术精制而成的富含 DHA 等营养物质的 DHA 藻粉，其主要成分为裂殖壶藻。主要适用范围：苗种培育、水产养殖、畜禽养殖、宠物驯养。纯净的裂殖壶藻略有鱼香味，而无其他异味，富含 DHA（占总脂肪 50%以上）、蛋白质、核苷酸、多糖、维生素及其它生物活性物质。本实验原理：样品与浓硫酸和硫酸铜、硫酸钾一同加热消化，使蛋白质分解，分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵，然后碱化蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后以硫酸标准滴定溶液滴定，根据酸的消耗量，计算样品中粗蛋白的含量。

2 仪器与试剂

2.1 仪器

K1160/K1100F 全自动凯氏定氮仪；SH420F 石墨消解仪；电子分析天平。

2.2 试剂

硫酸（分析纯），20g/L 硼酸溶液，溴甲酚绿-甲基红混合指示剂，40%氢氧化钠，混合催化剂片（3gK₂SO₄、0.2gCuSO₄），0.1mol/L 硫酸标准滴定液。

3 实验方法

3.1 取样

准确称取混匀样品 0.5g（精确值 0.1mg）左右，加入消化管，再加入混合催化剂 3gK₂SO₄、0.2gCuSO₄，加入 10mL 浓硫酸。

3.2 消解

利用石墨消解炉进行消解，将消化管放在石墨炉上，盖上排气罩，连接废气吸收系统，消化完毕后，将消化管取下冷却至室温。消化过程采用曲线升温模式，设定消解参数：

3.3 测试

将消化管放置于定氮仪上。定氮仪设置程序如下：

4 结果与讨论

4.1 实验结果

4.2 结论

该 DHA 藻粉氮含量平均值为 10.7769 %，所得结果误差符合国标《GB/T 6432-2018 饲料中粗蛋白的测定 凯氏定氮法》要求的两次独立测定结果与其算术平均值的JD差值与该平均值的比值不超过 1%，重复性良好。

参考文献

[1]GB/T 6432-2018 饲料中粗蛋白的测定 凯氏定氮法[S]. 

[2]GB/T 23181-2008 微生物饲料添加剂通用要求[S].