鱼肉中妥布霉素的测定 SPE-UPLC-MS/MS法-ProElut PXC+Platisil CN

1.标准品配制

(1)单标储备液1000 ug/mL，准确称取妥布霉素，用水配制成1000 ug/mL的储备液。

(2)中间液10.0 ug/mL，吸取适量单标储备液1000 ug/mL，用水配制成10 ug/mL的中间液。

2.提取

(1) 称取样品（鱼肉）5.0g（极ng确至0.05g），置于50mL离心管中。加入20 mL三水（25 g/L）和2 mL二氯甲烷，涡旋分散，振荡5 min，8000 r/min离心2min，收集上清液；

(2) 在上清液中加入5mL乙腈混匀，8000 r/min离心2min，待净化（离心为了去除乙腈水溶解时产生的气泡）。

3.净化

ProElut PXC 60mg/3mL（Cat.#68203）

同方法制备基质匹配标准溶液。

UPLC 条件：

色谱柱：Platisil CN，150×4.6 mm，5 μm  (Cat#：99506)

流  速：0.5 mL/min    进样量：5 μL   柱  温：35 ℃

流动相： A：3%甲酸水    B：3%甲酸乙腈    A：B=9:1

质谱条件：

电离模式：ESI            扫描方式：正离子扫描

检测方式：多反应监测     电喷雾电压：5500 V

雾化气压力：60 psi        辅助气压力：60 psi

气帘气压力：25 psi        离子源温度：550 ℃

目前有关妥布霉素检测的文献和标准较少，主要参考标准《GB/T 21323-2007 动物组织中氨基糖苷类药物残留量的测定 GX液相色谱-质谱质谱法》；GX液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)具有高灵敏度和高特异性，适用于基质复杂、样品组分含量很低的兽药残留的确证分析。