水产品中组胺的测定

样品准备

提取

1 称量 烟熏鱼等干制品：称取样品2.5 g（极ng确到0.01 g）于50 mL 离心管中。 金枪鱼等湿制品：称取样品5.00 g（极ng确到0.01 g）于50 mL 离心管中。

2 混合提取 向离心管中加入20 mL 组胺提取液*，涡旋混合1 min。60 ℃，100 rpm 恒温水浴振荡30 min。4000 rpm 离心10 min。取出6 mL 上清液，用50%磷酸水溶液调节pH 在2~3 之间，作为上样液待净化。

*组胺提取液：50 mmol/L 磷酸二氢钾+纯甲醇（1+1）

SPE柱净化——ProElut PXC 150 mg/6 mL（Cat.#68204）

(1)活化： 依次加入6 mL 甲醇，6 mL 水，流出液弃去。

(2)上样： 将上样液加入柱中，流出液弃去。

(3)淋洗： 依次用6 mL 0.1 MHCl 水溶液，6 mL 氨水+甲醇+水（5+5+90） 淋洗，淋洗液弃去。。

(4)洗脱： 6 mL 氨水+甲醇+水（5+60+35）洗脱，收集流出液。

(5)重新溶解： 将收集的洗脱液用氨水+甲醇+水（5+60+35）定容到6mL。上 机分析。

色谱柱： Diamonsil C18（2），150mm×4.6mm，5μm（Cat.#99603）

流速： 1.0 mL/min

检测器：* FLD Ex: 345 nm,Em: 445 nm；

柱温： 30 ℃

进样量： 10 μL

流动相： A．甲醇，B．磷酸-三乙胺缓冲液* A:B= 40:60 进样程序7.5μL OPA+10 μL 样品+7.5μL OPA*

*磷酸-三乙胺缓冲液配制方法是1L 水溶液中加入12.5mL 三乙胺和25.7mL 磷酸。

*邻苯二甲醛衍生试剂通过将25.0 mg OPA溶于1.0 mL甲醇，0.1 mL 2-巯基乙醇和10 mL硼酸钾缓 冲液(pH 10.0)制得。

适用于水产品中组胺的测定。