食品添加剂TBHQ、BHT的HPLC检测方案

食品添加剂TBHQ、BHT的HPLC检测方案

TBHQ和BHT属于食品添加剂中的抗氧化剂，能防止或延缓油脂或食品成分氧化分解、变质，提高食品稳定性的物质。但抗氧化剂的添加必须符合我国食品卫生法的规定，过量添加会损害人体健康。例如BIA对大鼠前肖有致癌作用，BHT有YZ人体呼吸酶活性等嫌疑并且可在人体内蓄积。而根据国家标准GB2760相关规定，特丁基对苯二酚(简称“TBHQ”)和二丁基羟基甲苯(简称“BHT”)两种食品添加剂不能添加到糕点或糖果类食品中。

　亿鑫仪器推出梯度GX液相色谱仪对油脂食品中常用的抗氧化剂BHA(丁基羟基茴香醚)、BHT(二丁基羟基甲苯)、PG(没食子酸丙酯)和TBHQ (叔丁基对苯二酚)的检测方法，详细方法如下。

1、仪器与试剂

1.1  仪器
　　梯度液相色谱仪
　　Vertex色谱柱 4.6 mm×250 mm×5 μm
    旋转真空蒸发仪
　　Millipore Express 反渗透纯水系统
　　25 ml具塞玻璃离心管

1.2  试剂
　 正己烷：分析纯

乙腈：色谱纯
异丙醇：分析纯

甲醇：色谱纯

乙酸：分析纯

2、色谱条件
　　色谱柱：VertexC18（4.6 mm×250 mm×5 μm）
　　柱温：40℃
　　流动相：1.5%（体积分数）乙酸-甲醇溶液（A），1.5%（体积分数）乙酸-水溶液（B），

洗脱梯度：0m in-5m in，流动相A为30%,5m in-20m in，流动相A从30%线性增至80%, 20 min-30 min，流动相A为80%;
　　流速为：1.0mL/min
　　进样量：25μL
　　检测波长为：280 nm

3、实验原理
　　油脂样品用正己烷溶解，用乙睛提取其中的抗氧化剂。提取液经浓缩后，用异丙醇定容，用带紫外检测器的GX液相色谱仪测定，外标法定量。

4、试样溶液的制备
　　量取样品1g于离心管中，加入5ml乙腈饱和的正己烷盖上盖后于旋涡混合器上充分混匀，再加入10m正己烷饱和的乙腈于旋涡混合器上充分混匀，静置分层，用胶头吸管将乙睛层转人浓缩瓶内，如上操作再用正己烷饱和的乙腈提取两次，合并提取液。

乙腈提取液在40℃下，用旋转真空蒸发器浓缩至约1m L，将浓缩液转至5m L刻度管中，用异丙醇定容至2 mL，用0. 45 um微孔滤膜过滤后进样25 ul测定。

5、抗氧化剂标准溶液谱图