小鼠抗核抗体（ANA)elisa试剂盒使用说明书

小鼠抗核抗体（ANA)酶联免疫分析（ELISA）
试剂盒使用说明书
本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定小鼠血清，血浆,细胞上清及相关液体样本中小鼠抗核抗体（ANA)含量
实验原理：
本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中小鼠抗核抗体（ANA)水平用纯化的小鼠ANA抗原包被微孔板，制成固相抗原，往包被抗原的微孔中依次加入抗核抗体（ANA)，再与HRP标记的ANA抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色颜色的深浅和样品中的抗核抗体（ANA)呈正相关用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠抗核抗体（ANA)浓度
试剂盒组成：
试剂盒组成 48孔配置 96孔配置 保存
说明书 1份 1份
封板膜 2片（48） 2片（96）
密封袋 1个 1个
酶标包被板 1×48 1×96 2-8保存
标准品：27ng/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8保存
标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶 2-8保存
酶标试剂 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8保存
样品稀释液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8保存
显色剂A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8保存
显色剂B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8保存
终止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8保存
浓缩洗涤液 （20ml×20倍）×1瓶 （20ml×30倍）×1瓶 2-8保存

样本处理及要求：
1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心
2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心
3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心胸腹水脑脊液参照实行
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集离心20分钟左右（2000-3000转/分）仔细收集上清检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份离心20分钟左右（2000-3000转/分）仔细收集上清保存过程中如有沉淀形成，应再次离心
5. 组织标本：切割标本后，称取重量加入一定量的PBS，PH7.4用液氮迅速冷冻保存备用标本融化后仍然保持2-8的温度加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分离心20分钟左右（2000-3000转/分）仔细收集上清分装后一份待检测，其余冷冻备用
6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验若不能马上进行试验，可将标本放于-20保存，但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性