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小鼠抗核抗体(ANA)elisa试剂盒使用说明书

小鼠抗核抗体(ANA)酶联免疫分析(ELISA)
试剂盒使用说明书
本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定小鼠血清,血浆,细胞上清及相关液体样本中小鼠抗核抗体(ANA)含量
实验原理:
本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中小鼠抗核抗体(ANA)水平用纯化的小鼠ANA抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被抗原的微孔中依次加入抗核抗体(ANA),再与HRP标记的ANA抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色颜色的深浅和样品中的抗核抗体(ANA)呈正相关用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠抗核抗体(ANA)浓度
试剂盒组成:
试剂盒组成 48孔配置 96孔配置 保存
说明书 1份 1份
封板膜 2片(48) 2片(96)
密封袋 1个 1个
酶标包被板 1×48 1×96 2-8保存
标准品:27ng/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8保存
标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶 2-8保存
酶标试剂 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8保存
样品稀释液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8保存
显色剂A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8保存
显色剂B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8保存
终止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8保存
浓缩洗涤液 (20ml×20倍)×1瓶 (20ml×30倍)×1瓶 2-8保存

样本处理及要求:
1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心胸腹水脑脊液参照实行
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集离心20分钟左右(2000-3000转/分)仔细收集上清检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份离心20分钟左右(2000-3000转/分)仔细收集上清保存过程中如有沉淀形成,应再次离心
5. 组织标本:切割标本后,称取重量加入一定量的PBS,PH7.4用液氮迅速冷冻保存备用标本融化后仍然保持2-8的温度加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分离心20分钟左右(2000-3000转/分)仔细收集上清分装后一份待检测,其余冷冻备用
6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验若不能马上进行试验,可将标本放于-20保存,但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性

文件大小:93.5KB

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