FAQ|解密乳胶微球应用,你想知道的,都在这里!
2024-03-081103随着带量采购的快速推进,生化试剂的绝大多数常规项目已被纳入集采。在当前行业风云变幻的背景下,生化诊断凸显出技术成熟、临床应用广泛、菜单丰富、检测成本低廉及检测速度快等优势。然而,在胶乳试剂开发的复杂过程中,常常会遇到各种挑战。从微球的选择到偶联工艺优化,每个环节都可能引发疑惑。接下来,与您一同深入探讨胶乳试剂开发中的常见问题,并提供详尽解答。
常见问题解答
Q:胶乳试剂的开发流程主要包括哪些步骤?
Q:如何筛选出合适的偶联工艺?
Q:乳胶微球在活化时出现聚集,应如何解决?
微球在活化的过程中出现聚集的原因及解决办法如下:
1、 EDC活化剂的加入量过多,可适当减少EDC用量;
2、 微球浓度过高,可适当降低微球浓度;
3、 偶联缓冲液(微球稀释液)浓度和pH不合适,需进行优化。
Q:乳胶微球在加入抗体后出现聚集,应如何避免?
1、 将抗体进行稀释后再与微球混合;
2、 优化偶联缓冲液浓度及摸索合适的pH。
Q:微球包被完成后,胶乳试剂检测空白(去离子水)时的反应度很高,应如何解决?
1、 降低R1中增敏剂用量(增敏剂可选用PEG系列、葡聚糖、PVP等,用量应根据具体情况进行调整);
2、 减少抗体加入量;
3、可适当延长超声时间,以确保超声充分。
Q:胶乳试剂37℃老化或4℃存放一段时间出现聚沉,是什么原因?
可能是由于体系中的偶联缓冲液、封闭液或保存液不合适引起的聚沉,建议从以下几个方向进行优化:
1、 优化保存液,包括种类、浓度及pH等(详见上述表格);
2、在保存液中加入一定量的甘油(2%-10%)或加入5%-10%糖类(如蔗糖、海藻糖等)来提高试剂稳定性;
3、 若以上方法仍不能解决聚沉问题,则需进一步优化偶联工艺(包括调整偶联缓冲液种类、浓度及pH值;封闭液种类及浓度等)。
Q:胶乳试剂在37℃老化或4℃存放后,空白吸光度有所升高的原因及解决措施?
1、 微球包被完成后,超声不充分可能会引起空白吸光度升高,可通过适当延长超声时间来解决;
2、 保存液的pH值不匹配可能导致空白吸光度的升高,应进一步摸索合适的pH条件;
3、 优化封闭液,尝试不同种类的封闭剂并摸索合适浓度。
Q:当进行了多次尝试,仍没有筛选到合适的微球时,该如何应对?
不同厂家所采用的微球制备工艺不同,使得微球适配的偶联工艺也有所差异。当客户在筛选微球的过程中进行多次尝试仍无法解决问题时,还可根据客户的个性化需求从微球制备工艺及试剂两个方面入手,提供针对性的优化方案:
Q:乳胶微球有哪些优势?
针对胶乳免疫比浊应用,可以为客户提供粒径范围分布在80-400nm的乳胶微球,该系列产品的优势包括:
1、 微球表面充足的功能基团可高效偶联足量目的蛋白
2、 微球粒径均一,功能基团稳定可控,使其在应用中具有良好的重复性
3、 单批次产能可达100升以上,批间差异较小,可规模化生产及稳定供货
4、 为满足客户的不同开发需求,还可定制微球粒径及表面功能基团数量
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