紫外检测:常规紫外光波长下检测样品吸光值;* 核酸检测:可检测dsDNA、ssDNA、RNA等不同类型核酸的浓度及其在260nm、280nm处的吸光值;* 探针检测:检测荧光标记探针的吸光值,* 细胞培养物检测:检测细胞培养物在600nm处的吸光值;* 蛋白检测:检测普通纯化后蛋白的浓度和280nm处的吸光值;
NanoDrop one超微量分光光度计
NanoDrop one超微量分光光度计是NanoDrop的新产品,应用液体的表面张力特性,样品体积只需要 0.5~2ul,在检测台上,经上下臂的接触拉出固定的光径达到快速、微量、高浓度、免石英管、免毛细管等耗材检测吸收值的优点。此产品设计受保护,并在全世界广受欢迎,其准确度与便利性让科学家得以更有效率进行各项研究。
NanoDrop one超微量分光光度计使用高能量氙灯(pulsed xenon flash lamp)可提供190~840nm的全光谱检测,且不需要暖机,开机后立即使用。搭配高感度CCD array检测器,检测吸收值可高达300Abs(dsDNA浓度2~15000ng/ul),大部分纯化后的核酸几乎都不需要稀释即可检测。待测样品的均质性是的高要求,一般核酸、蛋白质样品能在检测前以vortex mixer震匀为hao,若无vortex mixer也应以pipette吸放数次混匀。若担心genomic DNA可能因前述动作而断裂,则改以55?C加热约一分钟,使样品在侦测前呈现均匀状态,以确保 2ul 具有代表性。检测时选择不同检测模式,可以得到快速的结果:● Nucleic Acid – 吸收光谱、230nm, 260nm, 280nm吸收值(换算成10mm光径吸收值)、260/280 ratio、260/230 ratio及核酸浓度。● UV-Vis – 190~840nm间所有波长的吸收值及光谱(以1mm光径吸收值呈现)。● A280蛋白质定量法 – 280nm吸收值(换算成10mm光径吸收值)、260/280 ratio及蛋白质浓度。仅适用于纯化后的蛋白质,须具有已知的质量消光系数(mass extinction coefficient)方可计算。● BCA、Bradford及Lowry – 依不同呈色剂提供不同波长吸收值结果,自动画出标准曲线并计算R square,待测蛋白质浓度。 * 蛋白质检测模式目前提供BCA、Bradford及Lowry三种常见定量呈色剂,因呈色剂随时间会逐渐加深,使用前请详阅试剂说明书并制备不同浓度的标准品,在kuai时间内完成检测,以得到良好的标准曲线。每个标准曲线多可有七个标准品,每个标准品多可做五重复。
* 测蛋白质时样品体积需使用 2ul,每个样品检测后需以Kimwipes 低尘擦拭纸擦拭15~20回,以避免呈色剂与蛋白质的残留。
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