多西环素检测试剂盒

深圳艾瑞斯多西环素检测试剂盒采用间接竞争ELISA方法检测组织、蜂蜜、鸡蛋等样本中的多xi环素药物（Doxycycline，DOX），试剂盒由预包被偶联抗原的酶标板、辣根酶标记物、抗体、标准品及其他配套试剂组成。检测时，加入标准品或样品溶液，样本中的药物和酶标板上预包被偶联抗原竞争抗药物抗体，加入酶标记物后，用TMB底物显色，样本吸光度值与其所含多xi环素药物含量成负相关，与标准曲线比较即可得出样本中多xi环素药物的残留量。

深圳艾瑞斯多西环素检测试剂盒技术指标

2.1 试剂盒灵敏度：0.05ppb(ng/ml)

2.2 反应模式：37℃，30min～30min～15min

2.3 检测下限：

组织、肝脏、鸡蛋…………………2ppb

蜂蜜…………………………………2ppb

尿样………………………………0.5ppb

牛奶………………………………2.5ppb

奶粉…………………………………4ppb

2.4 交叉反应率：

多西环素……………………………100%

四环素………………………………143%

金mei素………………………………15%

土mei素………………………………15%

2.5 样本回收率：

组织…………………………85±20%

肝脏、鸡蛋…………………75±20%

蜂蜜…………………………85±20%

尿样…………………………80±20%

牛奶、奶粉…………………75±20%

3 试剂盒组成

酶标板………………………96孔

高浓度标准品溶液1瓶：（1ml/瓶）1.0ppm（高标准液有挥发性，需注意密封）

标准品溶液0ppb、0.05ppb、0.15ppb、0.45ppb、1.35ppb、4.05ppb（均为空瓶子，现配现用）。

酶标记物（红盖）……………………11ml

抗体工作液（蓝盖）…………………5.5ml

底物液A（白盖）……………………6ml

底物液B（黑盖）……………………6ml

终止液（黄盖）………………………6ml

20×浓缩洗涤液（白盖）……………40ml

5×复溶液（黄盖） …………………50ml

说明书…………………………………1份

盖板膜…………………………………1张

自封袋…………………………………1个

酶联免疫试验步骤

将所需试剂从4℃冷藏环境中取出，置于室温平衡30min以上, 洗涤液冷藏时可能会有结晶需恢复到室温以充分溶解，每种液体试剂使用前均须摇匀。取出需要数量的微孔板及框架，将不用的微孔板放入自封袋，保存于2-8℃。

实验开始前需配制标准品应用液；低浓度的标准品不稳定，需现配现用。

在0ppb的瓶中加复溶液3ml，0.05ppb、0.15ppb、0.45ppb、1.35ppb的瓶中分别加复溶液2ml，4.05ppb的瓶中加复溶液3ml。

标准液6：取1.0ppm高浓度标准品溶液12ul加入装有3ml 复溶液4.05ppb的瓶中，盖紧，混匀，浓度即为4.05ppb。

标准液5：取1ml标准液6加入装有2ml 复溶液1.35ppb的瓶中，盖紧，混匀，浓度即为1.35ppb。

标准液4：取1ml标准液5加入装有2ml 复溶液0.45ppb的瓶中，盖紧，混匀，浓度即为0.45ppb。

标准液3：取1ml标准液4加入装有2ml 复溶液0.15ppb的瓶中，盖紧，混匀，浓度即为0.15ppb。

标准液2：取1ml标准液3加入装有2ml 复溶液0.05ppb的瓶中，盖紧，混匀，浓度即为0.05ppb。

标准液1：直接使用复溶液，浓度即为0ppb。

6.1 编    号：将样本和标准品对应微孔按序编号，每个样本和标准品做2孔平行，并记录标准孔和样本孔所在的位置。

6.2 加样反应：加标准品应用液或样本50µl/孔到各自的微孔中，然后加抗体工作液50µl/孔，轻轻振荡5秒混匀，37℃避光反应30分钟。

6.3 洗    涤：小心揭开盖板膜，甩去孔内液体，每孔加350ul工作洗涤液，静置30秒后弃去，重复洗涤5次，一次拍干。（用吸水纸拍干，拍干后未被清除的气泡可用干净的枪头刺破）。

6.4 加酶反应：加酶标记物100µl/孔，37℃避光反应30分钟。

6.5 洗    涤：同上

6.6 显    色：加底物液A 50µl/孔，再加底物液B 50µl/孔，轻轻振荡5秒混匀，37℃避光显色15分钟（若蓝色过浅，可适当延长反应时间）。

6.7 终    止：加终止液50µl/孔，轻轻振荡混匀，终止反应。