猪口蹄疫病毒vp1结构蛋白抗体检测试剂盒

猪口蹄疫病毒vp1结构蛋白抗体检测试剂盒（酶联免疫法）

英文名：Test Kit for Antibodies to Porcine Foot and Mouth Disease Virus O（ELISA）

【包装规格】96T×1/盒、96T×2/盒

【预期用途】口蹄疫是由口蹄疫病毒（Foot and Mouth Disease Virus，FMDV）引起的偶蹄动物的一种急性、热性、高度接触性传染病，其特征为口腔黏膜、蹄部、乳房皮肤发生水泡和烂斑。

【原   理】

猪口蹄疫病毒vp1结构蛋白抗体检测试剂盒由预包被口蹄疫病毒O型VP1抗原的酶标板、酶标记物及其他配套试剂组成，应用酶联免疫法（ELISA）原理检测猪血清、血浆样本中猪口蹄疫病毒O型抗体。实验时在酶标板中加入对照血清和待检样本，经温育后若样品中含有猪口蹄疫病毒O型抗体，则将与酶标板上抗原结合，经洗涤除去未结合的其他成分后；再加入酶标记物，与酶标板上抗原抗体复合物发生特异性结合；再经洗涤除去未结合的酶标记物，在孔中加TMB底物液，与酶反应形成蓝色产物，显色深浅与样品中的特异性抗体含量成正相关；加入终止液终止反应后，产物变为黄色；用酶标仪在450nm波长测定各反应孔中的吸光值，即可知样品是否含有口蹄疫病毒O型抗体。

【试剂盒组成】

序号 名称 规格（96T×1） 规格（96T×2）

1. 酶标板 96T×1 96T×2

2. 酶标记物 (红盖) 11ml×1 11ml×2

3. 样品稀释液(黄盖) 50ml×1 50ml×1

4. 20X浓缩洗涤液 40ml×1 40ml×1

5. 底物液A (白盖) 6ml×1 11ml×1

6. 底物液B (黑盖) 6ml×1 11ml×1

7. 终止液 (黄盖) 6ml×1 11ml×1

8. 阳性对照 (红盖) 1.0 ml×1 1.5 ml×1

9. 阴性对照 (绿盖) 1.0 ml×1 1.5 ml×1

10. 盖板膜 1张 2张

11. 自封袋 1个 1个

12. 说明书 1份 1份

13. 稀释板 1块 2块

【储存及有效期】于2～8℃避光保存，有效期为12个月。

包被板开封后请于2～8℃避光保存，避免受潮。使用期限为2个月。

【样品准备】

1.取动物全血按常规方法制备血清，要求血清清亮，无溶血、无污染。样品1周内可于2～8℃保存，长期需置-20℃保存。

2.用样品稀释液将待检血清按40倍稀释（如5μl血清加入195μl样品稀释液中，混匀）。阴、阳性对照不用稀释。

3.浓缩洗涤液使用前应恢复至室温使沉淀溶解，然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释成工作洗涤液(如19份蒸馏水或去离子水+1份浓缩洗涤液)。

【检验方法】

1.使用前将试剂盒置室温30分钟，恢复至室温。

2.取所需用量酶标板条，设阴性/阳性对照各2孔，未用的板条尽快密封，2～8℃保存。

3.阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照100μl；样品孔每孔加入稀释后的样品100μl。

4.混匀，盖好盖板膜，置37℃（推荐水浴）避光反应30分钟。

5.甩去孔内液体，每孔加350μl工作洗涤液，静置30秒后弃去，重复洗涤5次，一次拍干。

6.每孔加酶标记物100μl，盖好盖板膜，置37℃避光反应30分钟。

7.洗涤，同步骤5。

8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl，混匀，盖好盖板膜，置37℃避光反应10分钟。

9.每孔加终止液50μl，混匀，于450nm(可用630nm作参比波长）测定各孔吸光值。

【参考值】 实验正常的情况下，阴性对照的平均OD值即ODNC应≤0.3，阳性对照的平均OD值即ODPC应≥0.6。