猪弓形虫抗体检测试剂盒

一、猪弓形虫抗体检测试剂盒

通用名：猪弓形虫IgG抗体检测试剂盒（酶联免疫法）

英文名：Diagnostic Kit for Antibodies to Porcine Toxoplasma(ELISA)

二、包装规格  96T×1/盒、96T×2/盒、96T*5/盒

三、预期用途  猪弓形虫病是由弓形虫（Toxoplasma，TOX）引起的一种原虫病，又称弓形体病。弓形虫病是一种人畜共患病，宿主的种类十分广泛，人和动物的感染率都很高。

猪弓形虫抗体检测试剂盒用于检测猪血清或血浆中弓形虫特异性抗体，评估猪场弓形虫感染状况。

四、试剂盒原理

猪弓形虫抗体试剂盒系由预包被弓形虫（TOX）重组抗原的酶标板、酶标记物及其他配套试剂组成，应用酶联免疫法（ELISA）原理检测猪血清、血浆样本中弓形虫抗体。实验时在酶标板中加入对照血清和待检样本，经温育后若样品中含有弓形虫抗体，则将与酶标板上抗原结合，经洗涤除去未结合的其他成分后；再加入酶标记物，与酶标板上抗原抗体复合物发生特异性结合；再经洗涤除去未结合的酶标记物，在孔中加TMB底物液，与酶反应形成蓝色产物，显色深浅与样品中的特异性抗体含量成正相关；加入终止液终止反应后，产物变为黄色；用酶标仪在450nm波长测定各反应孔中的吸光值，即可知样品是否含有弓形虫抗体。

五、猪弓形虫抗体检测试剂盒组成

酶标板、酶标记物、样品稀释液、浓缩洗涤液、底物液A、底物液B、阳性对照、阴性对照

六、储存及有效期

于2～8℃避光保存，有效期为12个月。

包被板开封后请于2～8℃避光保存，避免受潮。使用期限为2个月。

【检验方法】

1.使用前将试剂盒置室温30分钟，恢复至室温。

2.取所需用量酶标板条，设阴性/阳性对照各2孔，未用的板条尽快密封，2～8℃保存。

3.阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照100μl；样品孔每孔加入样品稀释液90μl，再加入稀释后的血清10μl。

注：样本稀释比例相当于1:100。

4.混匀，盖好盖板膜，置37℃（推荐水浴）避光反应30分钟。

5.甩去孔内液体，每孔加350μl工作洗涤液，静置30秒后弃去，重复洗涤5次，一次拍干。

6.每孔加酶标记物100μl，盖好盖板膜，置37℃避光反应30分钟。

7.洗涤，同步骤5。

8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl，混匀，盖好盖板膜，置37℃避光反应10分钟。

9.每孔加终止液50μl，混匀，于450nm(可用630nm作参比波长）测定各孔吸光值（A值）。

【参考值】 实验正常的情况下，阴性对照≤0.2，阳性对照≥0.6。

【检验结果的解释】

1.C.O（临界值）=2.1×阴性对照均值（阴性对照均值小于0.1时按0.1计算）；

2.样品A值＞C.O为阳性，样品A值≤C.O为阴性。