产品简介
Annealing Buffer for RNA Oligos (5×),即RNA寡核苷酸退火缓冲液,可以用于RNA Oligos的退火,可以有效避免RNA Oligos自身形成发夹结构,有利于退火的正确进行。该退火缓冲液不含RNase,可避免RNA的降解。
产品组分
组分名称 | 产品货号/规格 | |
JY04013 | JY04014 | |
RNA退火缓冲液(5×) | 2 mL | 5 mL |
DEPC水 | 8 mL | 20 mL |
保存条件
常温配送。一个月内,4 ºC保存。-20 ºC长期保存,至少1年有效。
注意事项
1.RNA易降解,需严格遵守RNA操作规范,防止RNase污染。
2.本产品仅用于科学研究,不得用于临床,不得用于食品和药品,不得存放于普通住宅内。
3.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明
1.溶解Oligos:
(1) 方法一:用去DEPC水将RNA退火缓冲液(5×)稀释成1×。 → 将1× RNA Oligos用RNA退火缓冲液配制成100 µM(根据实验要求调整浓度)。 → 取等体积RNA Oligo A和RNA Oligo B混匀。
(2) 方法二:将Oligos干粉用DEPC水配制成200 µM。 → 配置如下退火反应体系,混匀。
DEPC水 | 30 µL |
RNA退火缓冲液(5×) | 20 µL |
RNA Oligo A (200 μM) | 25 µL |
RNA Oligo B (200 μM) | 25 µL |
总体积 | 100 µL |
Note:Oligos的浓度根据实验要求进行调整。
2.退火:
(1) 方法一:将退火反应体系置于PCR仪中,设置反应条件:90℃变性1 min,-1℃/60s/cycle缓慢降温至25℃。程序设置以Bio-Rad的T100为例为:1. 90℃, 1:00; 2. 90℃, 1:00, -1℃ per cycle; 3. GOTO step 2, 65×; 4. 4℃, ∞。
(2) 方法二:将退火反应体系放于90°C水浴锅,持续1 min。后将退火反应体系置于一杯含有90°C热水的保温杯中,让其开盖自然冷却至室温。若无保温杯,则将退火反应体系置于2 L,90°C热水中降至室温亦可。
Note:缓慢降温对形成正确的结构是非常有帮助的,降温过快将导致错误高级结构的产生。
3.退火结束后可以直接用于转染细胞,也可以-80ºC冻存备用。
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