海关总署加急公函！Anavo快速推出新增硝呋索尔代谢物测定解决方案

各直属海关:

根据欧 盟 (EU ) 2019/1871 法规要求, 自 2022 年 11 月28 日起, 动物源性食品中氯霉素、 硝基呋喃类代谢物、孔雀石绿等药残的测定限值将执行新的标准. 根据《食品安全法》 的规定, 出口食品生产企业应当保证其出口食品符合进口国 (地区 ) 标准要求。

现就欧盟相关标准和要求通报如下:

一、自 2022 年 11 月28 日起 输政盟动物源性食品需符合氯霉素测定限值 0.15ug/kg、硝基呋喃代谢物 (增加硝呋索尔代谢物, 共5种) 测定限值 0.5ug/kg、孔雀石绿和隐形孔雀石绿总量测定限值0.5ug/kg 的标准要求。

二、根据欧盟 2002/994/EC 法规要求, 输欧盟养殖水产品

剥壳和/或加工虾、小龙虾、肠衣、兔肉、禽肉制品、蛋及蛋制品、蜂产品等动物源性食品，通批批检测氯霉素和硝基呋喃类代谢物。养殖水产品还应批批检测孔雀石绿和结晶紫。

                            ——海关总署（司）局函

      对于动物源性食品，氯霉素、硝基呋喃代谢物、孔雀石绿和结晶紫，相关监管单位一直在检测。此次，公函中紧急把硝呋索尔代谢物纳入了硝基呋喃代谢物中，共5种。硝呋索尔代谢物虽有相应的标准《SN/T 4520-2016》,但由于之前没有制定相应的限量标准，大多数单位并未开展此项目。为积极配合相关检测单位响应海关总署的安排，纳鸥科技的技术部门快速响应，第一时间推出硝呋索尔代谢物检测整体解决方案。

动物源食品中硝呋索尔代谢物残留的测定

      硝呋索尔(nifursol)，又称硝呋柳肼，是继呋喃唑酮、呋喃西林、呋喃它酮和呋喃妥因之后的文一种硝基呋喃类抗菌药物。

      硝呋索尔的结构和性质与呋喃唑酮等其它硝基呋喃类药物相似，原药在动物组织中代谢快速，但其有毒代谢产物则在动物体内能与蛋白紧密结合，形成稳定的结合态残留物，可在体内存在相当长时间，具有一定的毒性。

      硝呋索尔原药在动物体内的主要代谢产物为3.5-二硝基水杨酸肼(35-dinitrosalicylic acid hydrazideDNSA）和5-硝基-2-糠酸(5-nitro-2-furoicacid)，二者均可作为硝呋索尔的残留标志物。硝呋索尔及其代谢物的结构式如图所示。

试样制备和保存：(略）参见SN/T 4520-2021 动物源食品中硝呋索尔代谢物残留的测定。

水解和衍生化

      称取约200g均匀试样(精确到001g)于50mL塑料离心管中，依次加人10mL水0.5mL盐酸溶液和500μL2-硝基苯甲醛溶液(4.14),涡旋混匀后置于37℃恒温振荡器中反应16h。

       吸取标准工作液系列0.5μg/L、10μg/L、20μg/L、50μg/L、10ug/L、20μg/L、50μg/L各1mL于50mL塑料离心管中，按照样品水解和衍生化步骤同步进行水解和衍生。

提取和净化

• 衍生后试样,冷却至室温,加入5mL磷酸氢二钠溶液(4.13),用氢氢化钠溶液(412)调节pH值至7.0~7.5后，

• 过中性氧化铝小柱（Anavo AL-N SPE, 2 g, 12 mL, 货号: AN60C017），收集洗脱液。

• 在4℃下,经4000r/min离心3min后,上层清液转移至装有16mL乙酸乙酯的塑料离心管中，振荡提取10min后,在4℃下，于4000r/min离心3min,收集7酸乙酯层,

• 残留物用10mL乙酸乙酯再提取一次，合并两次乙酸乙酯提取液，收集液在40℃下用 氮气吹干,残渣用1mL定容液溶解再用2mL乙腈饱和的正己烷分两次液液萃取净化去脂。

• 下层溶液转移至2mL离心管中，15000r/min下离心5min，离心上清液过0.2μm滤膜后,滤液供液相色谱-质谱/质谱测定。

液相色谱条件

    液相色谱条件如下:   a)色谱柱：Anavo C18核壳柱，2.7µm, 150* 4.6mm，货号：AN80A011   b)流动相:A为乙腈,B为5mmol/L乙酸铵水溶液，流速:0.6mL/min,梯度洗脱条件见下表   c)柱温:30℃;

   d)进样量:20μL

液相色谱梯度洗脱条件

质谱条件（略）

回收率

分别在猪肉和猪肝中添加硝呋索尔代谢物，添加浓度和回收率如下：

谱图

标准品DNSAH衍生物的MRM色谱图(浓度为1.0μg/L)

相应耗材解决方案

注：1）硝呋索尔代谢物标准品，国内现有部分现货，欲购请尽快联系2）动物食品中脂类的去除，可使用Anavo HMR-Lipid——高效除脂专用柱，除脂率90%+。