如何分析高效液相色谱图?
2021-12-07430高效液相色谱法中,对色谱图分析是很重要的。你可以将色谱图看成一个横纵坐标为时间与数据的二维图。固定相则是像海绵一样的柱子,里面很多孔洞让样品流动,由于每个样品物质的吸附能力不同,在色谱图中会有不同的峰形。
保留时间是样品通过高效色谱柱所需要的时间,你在使用相同的流动相和hplc色谱柱分析同一样品时,出现的保留时间应该是固定的。如果保留时间不同可能是里面有杂质造成影响。
在液相色谱分离过程中,容易出现色谱图中未出峰、一个或者多个峰是负峰、宽峰、双峰、拖尾峰等问题,我们称之为鬼峰。鬼峰来源复杂且多样,主要来源于流动相中残留的污染物,缓冲盐等等。恒谱生鬼峰捕集柱对弱极性和非极性的有机杂质有强烈吸附作用,可以有效消除污染物,避免鬼峰出现对实验造成干扰,大幅度缩短实验时间,从而提高工作效率,还能延长液相色谱柱和仪器寿命。
如果发生进样量与峰面积不是线性关系的问题,那十之八九是样品在流动相中的溶解度小,导致有一部分部分样品被流动相冲入色谱柱中,沉积在柱入口端。
总之,实验影响的因素是复杂且多样的,做好一些预先准备工作能够预防一些问题的发生。比如在液相柱前添加一个色谱保护柱,能够过滤拦截样品中的污染物或者系统内的金属离子,能够有效避免峰型异常或者柱效不佳,影响高效液相色谱柱的使用寿命。
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