2020版药典之枸杞中甜菜碱含量的检测

【概述】

枸杞是茄科枸杞属的一种，果实称枸杞子，嫩叶称枸杞头。枸杞是人们对商品枸杞子、植物宁夏枸杞、中华枸杞等枸杞属下物种的统称。枸杞子具有多种保健功效，是卫生部批准的药食两用食物。适量食用有益健康，配合菊杞茶有清肝明目的效果。其质量标准在历版中国药典中以测定枸杞多糖和甜菜碱成分为标准。2015版中国药典一直以薄层扫描测定甜菜碱为主，直到 2020版中国药典才开始采用 HILIC体系的氨基柱进行分析，用碱性氧化铝（Alumina B）柱做前处理。本实验采用CLOVER Alumina B固相萃取柱（2g/12mL）对枸杞子进行前处理，柱子无需活化缩短实验时间，并用 CLOVER NH2 5μm，4.6×250mm色谱柱进行分析，甜菜碱保留效果好，峰形良好，干扰杂质少，能有效保证实验顺利进行。

适用范围

本方法（参考中国药典 2020版方法），适用于枸杞中甜菜碱含量的测定。

【实验/设备条件】

液相条件

色谱柱: CLOVER  NH2, 5 μm 4.6 × 250 mm

检测器: 195 nm

流动相: 85/15 v/v乙腈/水

流速: 1.0 mL/min

柱温: 30 ℃

进样体积: 10 µL

【样品提取】

【实验/操作方法】

1、对照品配制

称取适量甜菜碱对照品，精密称定，置于容量瓶中，用水定容至刻度线，即得浓度为 0.17mg/ml溶液。

2、样品提取

称取 1 g枸杞样品（精确到 0.01 g）于 50 mL离心管中，加入 50 mL甲醇溶液，涡旋震荡 1 min，超声20 min， 4000 r/min离心 3 min后，取上清液待净化。

3、样品净化

SPE柱：CLOVER Alumina B固相萃取柱（2g/12mL）

上样：加入 2 mL上清液，弃去；

洗脱：用 30 mL无水乙醇溶液进行洗脱，收集洗脱液，水浴蒸至近干，用超纯水溶液复溶并定容至 2 mL，后过 0.22μm MCE针式滤器至于2ml样品瓶中 ，上机检测。

【实验结果/结论】

样品加标回收率实验结果

实验结论                                        

由结果得出，选择中检维康的 CLOVER Alumina B固相萃取柱（2g/12mL），枸杞中甜菜碱的回收率大于 90%，并且可以有效去除杂质干扰，使得样品图谱更加干净，Alumina B固相萃取柱无需活化缩短实验时间。选择 CLOVER NH2色谱柱5μm，4.6×250mm，乙腈/水=85:15做流动相，甜菜碱对照品和实际样品中甜菜碱的理论塔板数分别为 8769和 10135，均超过药典规定的 3000，符合药典检测标准。

【仪器/耗材清单】

涡旋混匀仪（YQ-CL200）、碱性氧化铝固相萃取柱（货号ALB200012）、针式过滤器（CN13M22）、NH2色谱柱、甜菜碱对照品、无水乙醇、超纯水