北京中检维康生物技术有限公司
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CNTest 中药免疫亲和柱中国药典2020年通则2351真菌毒素测定法

CNtest玉米赤霉烯酮免疫亲和柱-中药专用

       (产品编号:QHZ105-ZY    

使用对象

CNtest免疫亲和柱由中检维康完全自主开发的系列产品,广泛地应用于中药、粮食、食品、饲料、坚果、植物油、调味品和酒类等样品的检测,该方法具有操作简单、准确性高,灵敏度高等特点。

CNtest玉米赤霉烯酮免疫亲和柱-中药专用柱是根据《中国药典2020版-2351真菌毒素测定法》独立开发的产品,它适用于药典中玉米赤霉烯酮亲和柱检测方法。同时我们对部分检测方法进行了优化,为大家提供更好的解决方案。

 

原理

样品经提取液提取、过滤、稀释,然后通过键合有玉米赤霉烯酮特殊抗体的免疫亲和柱。此时,玉米赤霉烯酮被亲和柱中的抗体特异性的吸附,用水或缓冲液将免疫亲和柱上的杂质除去,然后用甲醇使抗体变性,从而将玉米赤霉烯酮从亲和柱上洗脱下来。蕞后,用HPLC或荧光计进行定量检测。

储存条件

该亲和柱保存在2-8 °C条件下,绝不能冷冻,保质期为18个月。建议在室温(18-30°C)下使用。

实验溶液制备

1)      提取液,乙腈-水(9+1):取90mL乙腈加10mL水,混合均匀。

2)      HPLC流动相,乙腈-水(50+50):取500mL乙腈于1L容量瓶中,用纯水定容至1L,用0.22微米的尼龙筛过滤。

3)      标准溶液的配制:取玉米赤霉烯酮标准储备液,流动相为稀释液,配制标准品溶液。例如:取100uL标准品储备液10ug/mL于10mL容量瓶中,用甲醇定容至10mL,那么,玉米赤霉烯酮标准品浓度为100ng/mL          

注:配制好的标准品溶液有效期为7天。

4)      淋洗缓冲液,pH 7.0 PBS溶液:称取8.0g氯化钠,1.2g磷酸氢二钠,0.2g磷酸二氢钾,0.2g氯化钾,用990mL纯水溶解,然后用浓盐酸调节pH值至7.0,最后用纯水稀释至1000mL。

量取100mL  10X Clover淋洗缓冲液(货号:C3007)用900mL纯水稀释,混匀。

5)      0.5%的吐温/PBS将5.0mL吐温-20加入到1L pH 7.0 PBS溶液中,混匀。

量取100mL  10X 0.5%的吐温-20/pH7.0 PBS(货号:C3008用900mL纯水稀释,混匀。

 

液相色谱条件

    色谱柱:Cloversil-C18 4.6*150mm(5um)或4.6*250mm(5um)

流动相:乙腈-水(50+50,v/v)

流速:0.8mL/min

检测器:荧光检测器,激发波长232nm,发射波长460nm

进样体积:2-25uL

分析步骤:

样品提取稀释----样品净化----样品上机检测

  

需要准备的设备及试剂(中检维康提供)

C/N编号

物品

ZJ0612

科乐福CLOVER六位泵流操作架(配有1台空气泵,6个10mL针筒)

20202

高速匀质器,转速可达18,000 r/min ~22,000 r/min

31955C

微纤维滤纸(1.5um,100张/盒)

31240C

折叠式槽纹滤纸(100张/盒),或中速定性滤纸

36010C

一次性塑料烧杯(25/包)

34000C

一次性测试管(250支/包)

36020C

塑料漏斗(10 个/包)


玉米赤霉烯酮标准品


色谱纯级的甲醇和乙腈(4升/瓶)

C546150-U

科乐福Cloversil  C18 反相色谱柱4.6*150mm(5um)

C546250-U

科乐福Cloversil  C18 反相色谱柱4.6*250mm(5um)


玉米、饲料等基质含有不同水平黄曲霉毒素的质控样品

C3007-250

10X Clover淋洗缓冲液

C3008-250

10X 0.5%的吐温-20/pH7.0 PBS溶液

 


 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 


CNtest免疫亲和柱由中检维康完全自主开发的系列产品,广泛地应用于中药、粮食、食品、饲料、坚果、植物油、调味品和酒类等样品的检测,该方法具有操作简单、准确性高,灵敏度高等特点。
CNtest玉米赤霉烯酮免疫亲和柱-中药专用柱是根据《中国药典2020版-2351真菌毒素测定法》独立开发的产品,它适用于药典中玉米赤霉烯酮亲和柱检测方法。同时我们对部分检测方法进行了优化,为大家提供更好的解决方案。

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