血清中代谢物的测定

1、样品准备 制备3-5 mL 血清，低温保存，备用。

2、净化

a 活化： 将1 mL 甲醇、1 mL 水分别加入ProElut PLS 30 mg/1 mL (Cat.#68002) 中，流出液弃去；

b 上样： 将1 mL 血清加入柱中，流出液弃去；

c 淋洗： 用2 mL 水淋洗小柱，流出液弃去，将小柱抽干；

d 洗脱： 用2 mL 甲醇洗脱，收集洗脱液；

e 重新溶解：30 oC 下将洗脱液减压蒸馏至干。

色谱柱：Diamonsil C18(2) 150 x 4.6 mm ID, 5 μm (Cat. #99601)

保护柱：EasyGuard C18 Kit (Cat. #6201)

流动相：甲醇/ 1% 乙酸水溶液=10/90

流速：1.0 mL/min

进样量：20 μL

柱温：室温

检测器：UV275 nm

适用于人和动物血清中黄嘌呤等代谢物的检测。

1. 尿酸；2. 黄嘌呤；3. 7- 甲基黄嘌呤；4. 1- 甲基尿酸；5. 3- 甲基黄嘌呤；6. 1,3- 二甲基尿酸；7. 可可碱；8. 1,7- 二甲基黄嘌呤；9. 茶碱