婴幼儿配方奶粉中维生素D2、D3的检测

提取

(1) 取4 g样品，加入3至5 mL柠檬酸水溶液*充分混匀，加入8 mL二甲基亚砜和10 mL甲醇，振荡提取10 min；

(2) 加入15 mL甲基叔丁基醚：正己烷=1:1*，振荡提取10 min，6000rpm离心2 min，取出上层清液；

(3) 向残渣中加入10 mL甲基叔丁基醚：正己烷=1:1，按照步骤(2)重复提取一次，合并两次上清液；

(4) 将上清液在35℃条件下减压蒸馏至近干，待净化。 柠檬酸水溶液*：20 g柠檬酸，加入100 mL水溶解； 甲基叔丁基醚：正己烷=1:1* 是体积比。

净化 ProElut VDC 2 g/12 mL（Cat.#65358）

a活 化：依次向柱中加入10 mL乙酸乙酯、10 mL正己烷，弃去流出液；

b上 样：用5 mL正己烷分两次洗涤旋蒸瓶并加入柱中，弃去流出液；

c淋 洗：依次加入10 mL正己烷、10 mL10%乙酸乙酯正己烷，弃去流出液；

d洗 脱：加入20 mL 10%乙酸乙酯正己烷，收集流出液；

e重新溶解：将洗脱液在35 ℃减压蒸馏至近干，用甲醇定容至1 mL，供HPLC分析。

色谱柱：Diamonsil C18(2), 250 mm×4.6 mm, 5 μm（Cat# 99603）

流 速：1.0 mL/min

进样量：20 μL

柱 温：30 ℃

检测器：UV 254 nm

流动相：A：95% 甲醇水溶液 B：甲醇

婴幼儿配方奶粉中维生素D2、D3的检测