米粉中维生素A、D2、D3、E的检测

样品准备

(1) 取2 g样品，加入0.4 g α-淀粉酶和10 mL水，充分混匀，60℃水浴30 min；

(2) 加入15 mLVc*和5 mL 氢氧化钾水溶液*，充分混匀，53℃水浴30 min，间隔振摇，离心取上清液，用水定容至50 mL，待净化。

*VC：维生素C的乙醇溶液（15 g/L）。 *氢氧化钾水溶液：称取固体氢氧化钾250 g，加入200 mL水溶解。

SPE柱净化——ProElut PLS 150 mg/6 mL (Cat.#：68004)

(1)活 化：依次向柱中加入5 mL甲醇、5 mL水，弃去流出液；

(2)上 样：再将待净化液加入柱中，弃去流出液；

(3)淋 洗：向柱中加入5 mL 30%乙醇水溶液，弃去流出液，抽干；

(4)洗 脱：向柱中加入30 mL 甲醇，收集流出液；

(5)重新溶解：将洗脱液在40 ℃减压蒸至近干，用甲醇定容至1 mL，供HPLC分析。

分析条件 色谱柱：Spursil C18-EP，250 mm×4.6 mm，5μm（Cat# 82106） 流 速：1.0mL/min 检测器：VA：UV 325 nm，VD2、VD3：UV 264 nm，VE：UV 294 nm 柱 温：30℃ 进样量：20 μL 流动相： A：水，B：甲醇