土壤中土霉素、四环素、金霉素和QL霉素的测定

样品准备

将土壤样品或沉积物冷冻干燥后，过20目筛，待检测。

样品提取

(1) 称取1g样品于15 mL离心管中，加入10 mL样品提取液*；

(2) 涡旋混合5 min， 4000 rpm下离心2 min，收集上清液；

(3) 将下层残留物按照（1）、（2）步骤重复提取两次，合并三次样品提取液，并用超纯水稀释至100 mL，混匀，待净化。

样品提取液：

Mcllvaine缓冲液*：甲醇（1:1）； *Mcllvaine缓冲液(pH 4.0)：称取磷酸氢二钠（Na2HPO4·12H2O）27.6 g、柠檬酸（C6H8O7·H2O）12.9 g、乙二胺四乙酸二钠盐37.2 g,用水溶解后稀释并定容至1000 mL。

SPE柱净化——ProElut PLS 200 mg/6 mL（Cat.#68012）

(1)活 化： 依次加入6 mL甲醇，6 mL水，流出液弃去。

(2)上 样： 将上样液加入柱中*，流出液弃去。

(3)淋 洗： 用6 mL水淋洗小柱，流出液弃去，然后将PLS柱抽干。

(4)洗 脱： 20 mL1%乙酸甲醇洗脱，收集洗脱液。

(5)重新溶解： 在45 ℃下用减压蒸馏将洗脱液浓缩至近干，然后用流动相重新定容至1mL。微孔滤膜*过滤后供仪器分析。

*由于上清液的量大于柱管体积，应分次上样，或者在PLS柱上加20mL储液管（Cat.#4811）,适配器（Cat.#4803）。

*微孔滤膜一般采用0.22 um尼龙膜（Cat.#37177）。

色谱柱： Spursil C18 150×4.6mm ID，5μm（Cat.#82001） 流 速： 1.0 mL/min 检测器：* UV 365 nm 柱 温： 30 ℃ 进样量： 20 μL 流动相A： 0.01 mol/L草酸水溶液 流动相B： 乙腈:甲醇 (1:1)

适用于土壤中土霉素、四环素、金霉素和QL霉素的检测。