动物组织中四环素类的测定

1 样品准备/提取 (1)称取5 克样品于塑料离心管中，加入20 mL Mcllvaine缓冲液； (2)涡旋混合2min，然后超声 10min，4000 rpm下离心1 min，收集上清液； (3)将下层残留物分别再用20mL、10mL Mcllvaine缓冲液再提取两次，重复上述操作，将三次提取的上清液并入离心管中，4000rpm下，离心10min； (4)*将上清液用快速滤纸过滤，留下滤液，待净化。 注：该步骤仅供参考，使用者可根据实验室现有过滤设备进行调整。 2 SPE柱净化——ProElut PLS 60mg/3mL（Cat.#68003） (1)活 化：依次加入3mL甲醇，3mL水，流出液弃去。 (2)上 样：将待净化的滤液加入柱中，流出液弃去。 (3)淋 洗：依次用3mL水，3mL5%的甲醇水溶液淋洗，流出液弃去，然后将PLS柱抽干。 (4)洗 脱：3mL甲醇洗脱，流出液收集。 (5)重新溶解：*将洗脱液在40℃减压浓缩至近干，然后用流动相重新定容至1mL。

色谱柱： Spursil C18 150×4.6mm ID，5μm(Cat.#82001) 

流 速： 1.0 mL/min 检测器： UV 365 nm 柱 温： 30 ℃ 进样量： 20 μL 流动相A： 0.01mol/L草酸水溶液 流动相B： 乙腈:甲醇1:1 梯度程序 时间0min-10.0min 流动相B从30%到50%；10.0min~10.5min 流动相B从50%到30%；10.5min~20min流动相B为30%

适用于禽、畜、水产品组织中四环素类药物的检测。

1. 土霉素；2. 四环素；3. 金霉素