奶制品中土霉素、四环素、金霉素、QL霉素的测定

1、提取

液态奶取20 mL；固态奶制品类称取2 g，加入20 mL 水稀释。

加入20 mL Mcllvaine 缓冲液*，涡旋混合2 min，4,000 rpm 以上离心10 min。

取20 mL 上清液，作为上样液待净化。

*Mcllvaine 缓冲液(pH 4.0) ：称取磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O) 27.6 g、柠檬酸(C6H8O7·H2O) 12.9 g、乙二胺四乙酸二钠盐37.2 g，用水溶解后稀释并定容至1,000 mL。

2、净化-ProElut PLS 150 mg/6 mL (Cat.#68004)

活化：依次加入6 mL甲醇，6 mL水，流出液弃去。

上样：将上述待净化液加入柱中，流出液弃去。

淋洗：依次用6 mL水，6 mL10%的甲醇水溶液淋洗，流出液弃去，然后将PLS柱抽干。

洗脱：6 mL甲醇洗脱，流出液收集。

重新溶解： 将洗脱液在40℃减压浓缩至近干，然后用流动相重新定容至1mL. 由于上清液的量大于柱管体积，应分次上样，或者在PLS柱上加20mL储液管（Cat#4811）适配器（Cat#4803）。

色谱柱：Spursil C18 150×4.6mm ID 5μm Cat.#82001

流速：1.0 mL/min

检测器：UV 365 nm

柱温： 30℃

进样量：20 μL

流动相A： 0.01 mol/L草酸水溶液 流动相B：乙腈甲醇=1:1

适用于液态奶、固态奶制品中土霉素、四环素、金霉素和QL霉素的检测。

1 土霉素、 2 四环素、 3 金霉素、 4 QL霉素