鸡蛋中沙星类药物的测定

1、提取

将鸡蛋搅匀，称取5 g 与5 mL 0.1 mol/L 磷酸二氢钾溶液（NaOH 溶液调节pH 7.0）混合，振荡提取5 min，6000 rpm 下离心10 min，上清液转入另一离心管，5 mL 0.1 mol/L 磷酸二氢钾溶液（NaOH溶液调节pH 7.0）重复提取一次，合并提取液。向提取液中加入10 mL 正己烷，剧烈振荡1 min，4000 rpm 下离心1 min，弃去正己烷，加入10 mL 正己烷重新提取一次，正己烷弃去，下层水相待净化。

2、净化

a 活化： 依次将5 mL 乙腈、5 mL 提取液* 加入ProElut C18 500 mg/6mL (Cat.#63105)，流出液弃去；

b 上样： 将待净化溶液加入柱中，流出液弃去；

c 淋洗： 5 mL 水淋洗，淋洗液弃去，并将C18 柱抽干；

d 洗脱： 3 mL 磷酸/ 三乙胺混合溶液+ 乙腈（80+20）洗脱，收集洗脱液与5 mL 具塞试管中，加水定容至3 mL，微孔滤膜过滤后，HPLC 分析

注： 提取液：0.1 mol/L 磷酸二氢钾溶液液（NaOH 溶液调节pH 7.0）； 磷酸/ 三乙胺混合溶液：3.4 mL 浓磷酸溶解在1000 mL 水中，滴加三乙胺调节pH 2.4

色谱柱：Diamonsil C18(2) 250 x 4.6 mm ID, 5 μm (Cat. #99603)

流速：1.0 mL/min

进样量：20 μL

柱温：室温

流动相：磷酸/ 三乙胺溶液+ 乙腈=80/10 (V/V) ；

注：磷酸/ 三乙胺溶液的配制：3.4 mL 浓磷酸溶解在1000 mL 水中，滴加三乙胺调节pH 2.4 检测器：荧光检测器，激发波长：280 nm，发射波长：450 nm

适用于鸡蛋中环丙沙星、达氟沙星和恩诺沙星的检测。