食品中三氯蔗糖的测定-HPLC法-ProElut PLS+Diamonsil C18(2)

1、标准品配制

  标准储备溶液：准确称取标准品，用水配制成10 mg/mL的储备液，吸取一定体积10 mg/mL储备液用水配成浓度为1000 ug/mL的储备液。

2、提取

2.1 含蛋白脂肪类液体：液态奶、酸奶、酱油和醋 10 mL样品，加入8 mL 水和2 mL 200 g/L乙酸铅溶液，振荡2 min，超声提取5 min，6000 rpm离心5 min，取         10 mL上清液，待净化。

2.2 含蛋白脂肪类固体：饼干、奶酪和奶茶 5 g样品，加入8 mL 水和2 mL 200 g/L乙酸铅溶液，振荡2 min，超声提取5 min，6000 rpm离心5 min，取10 mL上清       液，待净化。

2.3 饮料：可乐（量取前超声排气泡） 10 mL样品，加入10 mL 水，混匀，取10 mL，待净化。

2.4 果冻 5 g样品，加入5 mL 水，热水超声溶解，混匀，趁热净化。

3、净化 ProElut PLS 200 mg/6 mL（Cat#68012）

(1)活 化： 依次向柱中加入5 mL甲醇、5 mL水，弃去流出液；

(2)上 样： 将待净化液加入柱中，弃去流出液（控制流速不超过每秒1滴）；

(3)淋 洗： 向柱中加入5 mL20%甲醇水溶液，弃去流出液；

(4)洗 脱： 向柱中加入3 mL甲醇，收集流出液。

(5)定 容： 将洗脱液在50℃下减压蒸干，用流动相定容至1 mL，供HPLC分析。

色谱柱：Diamonsil C18(2) 150×4.6 mm，5 μm（Cat.#：99601），

流速：1.0 mL/min，

进样量：20 μL，

柱温：35 ℃，

检测器：SEDEX LT-ELSD，

温度：40℃，

压力：3.5 bar，Gain：6

流动相：A：水；B：乙腈

本方案适用于液态奶、酸奶、酱油、醋、饼干、奶酪、奶茶、可乐和果冻中三氯蔗糖的检测，方法定量限7.5 mg/kg。（GB 22255-2014 食品安全国家标准 食品中三氯蔗糖（蔗糖素）的测定中提取为75%甲醇水溶液，减压浓缩过程中暴沸严重，不易操作。）