有机肥中土霉素、四环素、金霉素、QL霉素的测定

1.样品准备

(1) 将1 g鸡粪与20 mL提取液 *加入塑料离心管；

(2) 涡旋混合1 min；超声提取 10 min，8000 rpm下离心5 min，收集上清液；

(3) 残留物用15 mL、10 mL提取液重复提取两次，合并三次提取液，水定容至50 mL，作为上样液；

(4) 取25 mL上样液(相当于0.5 g样品)，加入1 mL磷酸，8000 rpm下离心5 min，上清液在40 ℃下用减压蒸馏蒸至小于15 mL，加水50 mL，混匀待净化。

*提取液：Mcllvaine 缓冲液 */ 甲醇=1/1，pH=7.5 Mcllvaine

缓冲液（pH4.0）：称取磷酸氢二钠（Na2HPO4·12H2O）27.6 g、柠檬酸（C6H8O7·H2O）12.9 g、乙二胺四乙酸而钠盐37.2 g，用水用?溶解后稀释并定容至1000 mL。

2.SPE柱净化——ProElut PXA 500 mg/12 mL（Cat.#68307）上层 ProElut PLS 200 mg/6 mL（Cat.#68012）下层 将PXA与PLS用适配器连接（PXA在上层，PLS在下层），装在固相萃取装置上备用。

(1)活 化：依次加入10 mL甲醇，10 mL水，流出液弃去；

(2)上 样：将待净化液加入小柱，流出液弃去；

(3)淋 洗：加入5 mL水，流出液弃去；

(4)洗 脱：10 mL 1%乙酸甲醇溶液洗脱，收集洗脱液；

(5)重新溶解：将洗脱液在45 ℃下减压蒸干，1 mL水溶解残渣，上机分析。

分析条件 色谱柱：Spursil C18，150 mm×4.6 mm，5μm（Cat# 82001）

流 速：1.0mL/min

检测器：UV 365 nm

柱 温：30℃

进样量：20 μL

流动相：A：乙腈 / 甲醇=1/1，B：0.01 moL/L 草酸水溶液， 梯度： 时间t 0 10 10.5 20 B％ 70 50 70 70 *本方法中，目标化合物是由HPLC测定的，但这并不表明其他仪器不适合。当使用者采用其他方式进行检测时，同样可以采用本方法进行样品前处理

适用于有机肥中土霉素、四环素、金霉素、QL霉素检测。

1.土霉素 2.四环素 3.金霉素 4.QL霉素